Хемотаксис сперматозоидов — это форма наведения сперматозоидов , при которой сперматозоиды следуют градиенту концентрации хемоаттрактанта, выделяемого ооцитом , и таким образом достигают ооцита.
С момента открытия притяжения сперматозоидов к женским гаметам у папоротников более века назад [1] было установлено, что ориентация сперматозоидов в форме хемотаксиса сперматозоидов существует у большого количества видов [2] Хотя хемотаксис сперматозоидов распространен во всем царстве Metazoa , от морских видов с внешним оплодотворением, таких как морские ежи и кораллы , до людей, [2] [3] [4] большая часть современной информации о хемотаксисе сперматозоидов получена из исследований морских беспозвоночных, в первую очередь морских ежей и морских звезд . [5] Фактически, до недавнего времени догмой было то, что у млекопитающих ориентация сперматозоидов к ооциту не нужна. Это было связано с распространенным убеждением, что после эякуляции в женские половые пути большое количество сперматозоидов «мчится» к ооциту и конкурирует за его оплодотворение.
Исследования 1980-х годов [6] заставили это убеждение быть разрушенным, когда стало ясно, что только немногие из эякулированных сперматозоидов — у людей только ~1 из каждого миллиона сперматозоидов — успешно проникают в яйцеводы ( фаллопиевы трубы ) [4] [7] , а более поздние исследования показали, что сперматозоиды млекопитающих действительно реагируют хемотаксически. [8]
При хемотаксисе сперматозоидов ооцит выделяет хемоаттрактант , который, по мере своего распространения, образует градиент концентрации : высокая концентрация вблизи яйцеклетки и постепенно снижающаяся концентрация по мере увеличения расстояния от ооцита. Сперматозоиды могут ощущать этот хемоаттрактант и ориентировать свое направление движения вверх по градиенту концентрации по направлению к ооциту. Хемотаксис сперматозоидов был продемонстрирован у большого количества видов не млекопитающих, от морских беспозвоночных [2] [3] до лягушек. [9]
Хемоаттрактанты сперматозоидов у видов, не относящихся к млекопитающим, сильно различаются. Некоторые примеры приведены в Таблице 1. До сих пор большинство хемоаттрактантов сперматозоидов, которые были идентифицированы у видов, не относящихся к млекопитающим, представляют собой пептиды или низкомолекулярные белки (1–20 кДа ), которые являются термостабильными и чувствительными к протеазам . [2] [3] Исключениями из этого правила являются хемоаттрактанты сперматозоидов кораллов, асцидий , растений, таких как папоротники, и водорослей (Таблица 1).
Разновидность | Хемоаттрактант | Ссылки |
---|---|---|
Водоросли | Низкомолекулярные ненасыщенные феромоны циклической или линейной структуры (например, 532 Да пентозилированный гидрохинон в случае Chlamydomonas allensworthii ) | [3] [10] [11] |
Амфибии | Аллурин — белок 21 кДа (для Xenopus ) | [9] [12] |
Асцидии | SAAF — сульфатированный стероид: 3,4,7,26-тетрагидроксихолестан-3,26-дисульфат (для Ciona savignyi и intestinalis ) | [13] [14] [15] |
Кораллы | Липидоподобный длинноцепочечный жирный спирт CH 3 -(CH 2 ) 8 -CH=CH-CH=CH-CH 2 OH (для Montipora digitata ) | [16] |
Папоротники | Дикарбоновые кислоты, например, яблочная кислота в частично ионизированной форме (для Pteridium aquilinum ) | [17] |
Моллюски | SepSAP — пептид-амид из 6 остатков с последовательностью PIDPGV-CONH2 (для Sepia officinalis ) | [18] |
Морские ежи | Resact — пептид из 14 остатков с последовательностью CVTGAPGCVGGGRL-NH2 (для Arbacia punctulata ) | [19] |
Морская звезда | Startrak — термостабильный белок 13 кДа (для Pycnopodia helianthoides ) | [20] |
Разнообразие хемоаттрактантов поднимает вопрос о видовой специфичности в отношении идентичности хемоаттрактанта. Не существует единого правила для хемоаттрактантной специфичности. Таким образом, в некоторых группах морских беспозвоночных (например, гидромедузы и некоторые офиуры ) специфичность очень высока; в других (например, морские звезды) специфичность находится на уровне семейства, а внутри семейства специфичности нет. [2] [3] [22] У моллюсков , по-видимому, вообще нет специфичности. Аналогично, в растениях уникальное простое соединение [например, фукосерратен — линейный ненасыщенный алкен (1,3-транс 5-цис-октатриен)] может быть хемоаттрактантом для различных видов. [10]
Здесь также нет единого правила. У некоторых видов (например, у гидроидов , таких как Campanularia , или оболочников, таких как Ciona ), направление движения сперматозоидов резко меняется в сторону источника хемоаттрактанта. У других (например, у морского ежа, гидромедузы, папоротника или рыбы, такой как японский горчак) подход к источнику хемоаттрактанта является непрямым, и движение осуществляется повторяющимися петлями малого радиуса. У некоторых видов (например, у сельди или асцидии Ciona) активация подвижности предшествует хемотаксису. [2] [3] [23] [24] При хемотаксисе клетки могут либо ощущать временной градиент хемоаттрактанта, сравнивая занятость его рецепторов в разные моменты времени (как это делают бактерии [25] ), либо они могут обнаруживать пространственный градиент, сравнивая занятость рецепторов в разных местах вдоль клетки (как это делают лейкоциты [26] ). У наиболее изученного вида, морского ежа, сперматозоиды ощущают временной градиент и реагируют на него временным увеличением асимметрии жгутиков . Результатом является поворот на пути плавания, за которым следует период прямого плавания, [27], приводящий к наблюдаемым эпициклоидоподобным движениям, направленным к источнику хемоаттрактанта. [28] Конкретный механизм, с помощью которого сперматозоиды морского ежа ощущают временной градиент, был недавно идентифицирован как естественная реализация хорошо известного адаптивного контроллера, известного как поиск экстремума. [29]
Молекулярный механизм хемотаксиса сперматозоидов до сих пор не полностью изучен. Текущие знания в основном основаны на исследованиях морского ежа Arbacia punctulata , где связывание хемоаттрактанта (таблица 1) с его рецептором, гуанилатциклазой , активирует синтез цГМФ (рисунок 1). Результирующий рост цГМФ, возможно, активирует ионные каналы, селективные к K + . Последующая гиперполяризация активирует каналы, активируемые гиперполяризацией, и каналы, управляемые циклическими нуклеотидами (HCN). Деполяризующий входящий ток через каналы HCN, возможно, активирует каналы Ca 2+ , активируемые напряжением , что приводит к повышению внутриклеточного Ca 2+ . Этот рост приводит к асимметрии жгутиков и, следовательно, повороту сперматозоида. [23]
Модель пути передачи сигнала во время хемотаксиса сперматозоидов морского ежа Arbacia punctulata . Связывание хемоаттрактанта (лиганда) с рецептором — мембраносвязанной гуанилатциклазой (ГЦ) — активирует синтез цГМФ из ГТФ. Циклический ГЦМФ, возможно, открывает циклические нуклеотид-зависимые (ЦНГ) K + -селективные каналы, тем самым вызывая гиперполяризацию мембраны. Сигнал цГМФ прекращается гидролизом цГМФ через активность фосфодиэстеразы (ФДЭ) и инактивацию ГЦ. При гиперполяризации каналы, активируемые гиперполяризацией и управляемые циклическими нуклеотидами (HCN), допускают приток Na + , что приводит к деполяризации и тем самым вызывает быстрый вход Ca2 + через потенциал-активируемые каналы Ca2 + ( Cav ), ионы Ca2 + взаимодействуют неизвестными механизмами с аксонемой жгутика и вызывают увеличение асимметрии биения жгутика и, в конечном итоге, поворот или изгиб траектории плавания. Ca2 + удаляется из жгутика посредством механизма обмена Na + /Ca2 + . (Взято из [23] )
После того, как было обнаружено, что сперматозоиды человека накапливаются в фолликулярной жидкости [30] [31] и что существует значительная корреляция между этим накоплением in vitro и оплодотворением ооцита [30] , хемотаксис был обоснован как причина этого накопления. [8] Хемотаксис сперматозоидов позже был также продемонстрирован у мышей [32] и кроликов. [33] Кроме того, накопление сперматозоидов в фолликулярной жидкости (но без подтверждения того, что оно действительно отражает хемотаксис) было продемонстрировано у лошадей [34] и свиней. [35] Ключевой особенностью хемотаксиса сперматозоидов у людей является то, что этот процесс ограничен капацитированными клетками [36] [37] — единственными клетками, которые обладают способностью проникать в ооцит и оплодотворять его. [38] Это повысило вероятность того, что у млекопитающих хемотаксис является не только механизмом наведения, но и механизмом отбора сперматозоидов. [36] [37] Важно отметить, что доля капацитированных (и, следовательно, хемотаксически реагирующих) сперматозоидов низкая (~10% у людей), продолжительность жизни капацитированного/хемотаксического состояния короткая (1–4 часа у людей), сперматозоид может находиться в этом состоянии только один раз в своей жизни, и сперматозоиды становятся капацитированными/хемотаксическими в разные моменты времени, что приводит к непрерывной замене капацитированных/хемотаксических клеток в популяции сперматозоидов, т. е. к длительной доступности капацитированных клеток. [36] [39] Эти особенности сперматозоидов повысили вероятность того, что продление периода времени, в течение которого капацитированные сперматозоиды могут находиться в женских половых путях, является механизмом, развившимся у людей для компенсации отсутствия координации между оплодотворением и овуляцией. [7] [36] [37] [40]
У людей существует по крайней мере два различных источника хемоаттрактантов спермы. Один из них — кумулюсные клетки, которые окружают ооцит, а другой — сам зрелый ооцит. [41] Хемоаттрактант, выделяемый кумулюсными клетками, — это стероид прогестерон , эффективность которого доказана в пикомолярном диапазоне. [42] [43] [44] Хемоаттрактант, выделяемый ооцитом, еще более эффективен. [41] Это гидрофобная непептидная молекула, которая при секреции ооцитом находится в комплексе с белком-носителем. [45] Было показано, что дополнительные соединения действуют как хемоаттрактанты для сперматозоидов млекопитающих. Они включают хемокин CCL20 , [46] предсердный натрийуретический пептид (ANP), [47] специфические одоранты , [48] натрийуретический пептид типа C (NPPC), [49] и аллюрин, [50] и это лишь некоторые из них. Разумно предположить, что не все из них физиологически значимы.
Видовая специфичность не была обнаружена в экспериментах, сравнивающих хемотаксическую реакцию сперматозоидов человека и кролика на фолликулярные жидкости или кондиционированные яйцеклетки, полученные от человека, коровы и кролика. [51] Последующие выводы о том, что кумулюсные клетки как человека, так и кролика (и, возможно, других млекопитающих) секретируют хемоаттрактант прогестерон [42] [43] [44], достаточны для объяснения отсутствия специфичности в хемотаксической реакции сперматозоидов млекопитающих.
Сперматозоиды млекопитающих, как и сперматозоиды морских ежей, по-видимому, ощущают градиент хемоаттрактанта временно (сравнивая занятость рецепторов с течением времени), а не пространственно (сравнивая занятость рецепторов с течением пространства). Это происходит потому, что установление временного градиента при отсутствии пространственного градиента, достигаемое путем смешивания человеческих сперматозоидов с хемоаттрактантом [52] или путем фотовысвобождения хемоаттрактанта из его заключенного соединения [53] , приводит к отсроченным временным изменениям в поведении плавания, которые включают в себя повышенную частоту поворотов и событий гиперактивации . На основе этих наблюдений и вывода о том, что уровень событий гиперактивации снижается, когда хемотаксически реагирующие сперматозоиды плавают в пространственном градиенте хемоаттрактанта [53], было высказано предположение, что повороты и события гиперактивации подавляются, когда капацитированные сперматозоиды плывут вверх по градиенту хемоаттрактанта, и наоборот, когда они плывут вниз по градиенту. [52] [53] Другими словами, сперматозоиды человека приближаются к хемоаттрактантам, модулируя частоту поворотов и событий гиперактивации, подобно бактериям Escherichia coli . [25]
Как и у видов, не относящихся к млекопитающим, конечным сигналом хемотаксиса для изменения направления плавания является Ca 2+ . [54] Открытие прогестерона как хемоаттрактанта [42] [43] [44] привело к идентификации его рецептора на поверхности сперматозоидов – CatSper , канала Ca 2+ , присутствующего исключительно в хвосте сперматозоидов млекопитающих. [55] [56] (Однако следует отметить, что прогестерон стимулирует только человеческий CatSper, но не мышиный CatSper. [56] Соответственно, хемотаксис сперматозоидов к прогестерону не был обнаружен у мышей. [57] ) Однако молекулярные этапы, следующие за активацией CatSper прогестероном, неясны, хотя было предложено участие трансмембранной аденилатциклазы , цАМФ и протеинкиназы А, а также растворимой гуанилатциклазы , цГМФ , инозитолтрифосфатного рецептора и управляемого депо Ca 2+ канала. [58]
Хемотаксис — это механизм наведения на короткие расстояния. Таким образом, он может направлять сперматозоиды только на короткие расстояния, оцениваемые в порядке миллиметров. [59] Поэтому считается, что у млекопитающих хемотаксис сперматозоидов происходит в яйцеводе, близко к ооциту. Первые сперматозоиды могут хемотаксически направляться к комплексу ооцит-кумулюс градиентом прогестерона, выделяемого клетками кумулюса. [42] [43] [44] Кроме того, прогестерон может направлять внутрь сперматозоиды, уже присутствующие на периферии кумулюсного яйценосного облака. [42] Сперматозоиды, которые уже находятся глубоко внутри кумулюсного яйценосного облака, могут ощущать более сильный хемоаттрактант, выделяемый ооцитом [41] [45], и хемотаксически направляться к ооциту в соответствии с градиентом этого хемоаттрактанта. Однако следует иметь в виду, что этот сценарий может быть чрезмерным упрощением. Ввиду растущего числа различных хемоаттрактантов, которые открываются, физиология хемотаксиса in vivo может быть намного сложнее.