Нитроцефин
Химическое соединение
Фармацевтическая смесь
Нитроцефин
Идентификаторы
  • (6 R ,7 R )-3-[( E )-2-(2,4-динитрофенил)этенил]-
    8-оксо-7-[(2-тиофен-2-илацетил)амино]-
    5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-
    2-карбоновая кислота
Номер CAS
  • 41906-86-9 проверятьИ
CID PubChem
  • 6436140
ChemSpider
  • 4940809 проверятьИ
УНИИ
  • EWP54G0J8F
ChEMBL
  • ChEMBL480517
Панель инструментов CompTox ( EPA )
  • DTXSID401318525
Информационная карта ECHA100.164.734
Химические и физические данные
ФормулаС21Н16Н4О8С2​​​​​​​​​
Молярная масса516,50  г·моль −1
3D модель ( JSmol )
  • Интерактивное изображение
  • O=C(Cc1cccs1)N[C@@H]1C(=O)N2C(C(=O)O)=C(/C=C/c3ccc([N+](=O)[O-])cc3[N+](=O)[O-])CS[C@H]12
  • ИнЧИ=1S/C21H16N4O8S2/c26-16(9-14-2-1-7-34-14)22-17-19(27)23-18(21(28)29)12(10-35-20(17)23)4-3 -11-5-6-13(24(30)31)8-15(11)25(32)33/h1-8,17,20H,9-10H2,(H,22,26)(H,28,29)/b4-3+/t17-,20-/м1/с1 проверятьИ
  • Ключ:LHNIIDJCEODSHA-OQRUQETBSA-N проверятьИ
  (проверять)


Нитроцефин — это хромогенный цефалоспориновый субстрат, который обычно используется для обнаружения присутствия ферментов бета-лактамаз, вырабатываемых различными микробами. Опосредованная бета-лактамазой устойчивость к бета-лактамным антибиотикам, таким как пенициллин, является широко распространенным механизмом устойчивости для ряда бактерий, включая членов семейства Enterobacteriaceae , основной группы кишечных грамотрицательных бактерий . Существуют и другие методы обнаружения бета-лактамаз , включая ПЦР ; однако нитроцефин позволяет быстро обнаруживать бета-лактамазу , используя немного материалов и недорогое оборудование. [1] [2]

Структура

Как цефалоспорин , нитроцефин содержит бета-лактамное кольцо, которое подвержено гидролизу , опосредованному бета-лактамазой . После гидролиза деградированное соединение нитроцефина быстро меняет цвет с желтого на красный. Хотя нитроцефин считается цефалоспорином , он, по-видимому, не обладает антимикробными свойствами. [1]

Деградация и хромогенные свойства

Интактные бета-лактамные антибиотики действуют путем связывания с пенициллинсвязывающими белками (PBP), участвующими в синтезе пептидогликана . Бета-лактамазы гидролизуют амидную связь между карбонильным углеродом и азотом в бета-лактамном кольце восприимчивых бета-лактамов и членов подклассов бета-лактамов (включая некоторые цефалоспорины). После гидролиза амидной связи антибиотик теряет способность связывать бактериальные PBP и становится бесполезным. Визуальное обнаружение этого процесса по существу невозможно для большинства цефалоспоринов , поскольку сдвиг поглощения ультрафиолета от интактного по сравнению с гидролизованным продуктом происходит за пределами видимого спектра . Однако гидролиз нитроцефина приводит к сдвигу поглощения ультрафиолета внутри видимого спектра света от неповрежденного (желтого) нитроцефина (~380 нм) к деградированному (красному) нитроцефину (~500 нм), что позволяет визуально обнаруживать активность бета-лактамазы на макроскопическом уровне. [1]

Анализы обнаружения

В следующих анализах описываются методы, в которых нитроцефин может быть использован для обнаружения ферментов бета-лактамаз с использованием недорогих материалов и оборудования. [3] Рабочие растворы нитроцефина находятся в диапазоне от 0,5 мг/мл до 1,0 мг/мл.

Анализ поверхности слайда

  1. Добавьте одну каплю раствора нитроцефина (0,5 мг/мл) на поверхность чистого предметного стекла.
  2. С помощью стерильной петли выберите колонию с поверхности агара и смешайте с каплей.
  3. Появление красного окрашивания в течение 20-30 мин. указывает на активность бета-лактамазы .

Прямой контактный анализ

  1. Поместите одну каплю 0,5 мг/мл нитроцефина непосредственно на поверхность изолированной колонии .
  2. Появление красного окрашивания в течение 20-30 мин. указывает на активность бета-лактамазы .

Анализ суспензии в бульоне

  1. К 1 мл бульонной суспензии добавьте 3–5 капель 0,5 мг/мл Нитроцефина.
  2. Появление красного окрашивания в течение 20-30 мин. указывает на активность бета-лактамазы .

Анализ лизированных клеток

  1. Лизируйте 1 мл клеточной суспензии с помощью ультразвука.
  2. Добавьте 3–5 капель 0,5 мг/мл нитроцефина к лизированной клеточной суспензии.
  3. Появление красного окрашивания в течение 20-30 мин. указывает на активность бета-лактамазы .

Анализ фильтровальной бумаги

  1. Поместите небольшой кусочек фильтровальной бумаги (~3 x 3 см) в чистую чашку Петри или другую чистую изолированную поверхность и пропитайте (3-5 мл) раствором нитроцефина 0,5 мг/мл.
  2. Выберите изолированную колонию и размажьте ее по поверхности пропитанной фильтровальной бумаги.
  3. Появление красного цвета в течение 20-30 мин. указывает на активность бета-лактамазы.

[4]

Смотрите также

Ссылки

  1. ^ abc O'Callaghan CH, Morris A, Kirby SM, Shingler AH (апрель 1972 г.). «Новый метод обнаружения бета-лактамаз с использованием хромогенного цефалоспоринового субстрата». Antimicrobial Agents and Chemotherapy . 1 (4): 283– 8. doi : 10.1128 /AAC.1.4.283. PMC  444209. PMID  4208895.
  2. ^ Coudron PE, Moland ES, Sanders CC (октябрь 1997 г.). «Возникновение и обнаружение бета-лактамаз расширенного спектра у представителей семейства Enterobacteriaceae в медицинском центре для ветеранов: ищите и, возможно, найдете». Журнал клинической микробиологии . 35 (10): 2593–7 . doi :10.1128/jcm.35.10.2593-2597.1997. PMC 230016. PMID 9316913  . 
  3. ^ Parr TR, Pai CH, Bryan LE (июль 1984 г.). «Простой метод скрининга для бета-лактамазоположительных и -отрицательных ампициллин-устойчивых изолятов Haemophilus influenzae». Журнал клинической микробиологии . 20 (1): 131– 2. doi :10.1128/jcm.20.1.131-132.1984. PMC 271264. PMID  6378964 . 
  4. ^ "Протокол нитроцефина" (PDF) . TOKU-E.com . Архивировано из оригинала (PDF) 17 апреля 2016 г.
Взято с "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Нитроцефин&oldid=1244970708"