This article includes a list of general references, but it lacks sufficient corresponding inline citations. (January 2015) |
This article relies largely or entirely on a single source. (January 2015) |
Тесты IMViC представляют собой группу отдельных тестов, используемых в микробиологических лабораторных исследованиях для идентификации организма в группе колиформных бактерий . Колиформные бактерии — это грамотрицательные , аэробные или факультативные анаэробные палочки, которые производят газ из лактозы в течение 48 часов. Наличие некоторых колиформных бактерий указывает на фекальное загрязнение.
Термин «IMViC» является аббревиатурой для каждого из этих тестов. «I» означает индольный тест ; «M» означает метиловый красный тест ; «V» означает тест Фогеса-Проскауэра , а «C» означает цитратный тест . Строчная «i» означает просто «in», поскольку тест на цитрат требует, чтобы образцы колиформ были помещены «в цитрат».
Эти тесты полезны для различения представителей семейства Enterobacteriaceae .
В этом тесте рассматриваемый организм выращивается в пептонной воде. Он содержит триптофан , который под действием фермента триптофаназы преобразуется в молекулу индола , пируват и аммоний. Затем индол извлекается из бульона с помощью ксилена. Бульон стерилизуется в течение 15 минут при температуре около 121 °C. Для проверки бульона на образование индола используется реагент Ковача . Реактив Ковача состоит из амилового спирта, пара-диметиламинобензальдегида и концентрированной соляной кислоты . Реактив Ковача фактически используется для определения способности организма отделять индол от аминокислоты триптофана и добавляется после инкубации. Положительный результат обозначается розово-красным слоем, образующимся поверх жидкости.
Оба эти теста используют один и тот же бульон для роста бактерий. Бульон называется бульоном MR-VP. После роста бульон разделяется на две разные пробирки: одну для теста с метиловым красным (MR) и одну для теста Фогеса-Проскауэра (VP) .
Тест с метиловым красным определяет образование кислот, образующихся в ходе метаболизма с использованием пути ферментации смешанных кислот с использованием пирувата в качестве субстрата. Индикатор pH Метиловый красный добавляется в одну пробирку, и при pH ниже 4,2 появляется красный цвет, что указывает на положительный тест (используется ферментация смешанных кислот). Оставшийся желтый раствор (pH = 6,2 или выше) указывает на отрицательный тест, что означает, что используется ферментация бутандиола .
Тест VP использует альфа-нафтол и гидроксид калия для проверки наличия ацетилметилкарбинола (ацетоина), промежуточного продукта пути ферментации 2,3-бутандиола. После добавления обоих реагентов пробирку энергично встряхивают, а затем оставляют на 5–10 минут. Розовато-красный цвет указывает на положительный тест, что означает, что используется путь ферментации 2,3-бутандиола.
В 1930-х годах С. А. Козер провел эксперименты, которые использовались для изучения бактериального катаболизма органических кислот. [1] Козер обнаружил, что метаболизм цитрата может быть индикатором для бактерий, обнаруженных в естественной среде. Кроме того, цитрат можно использовать для различения бактериальных спиральных форм, обнаруженных в почве и водной среде, таких как Enterobacteiacea , и спиральных форм с фекальным загрязнением. Было обнаружено, что спиральные формы без фекального загрязнения росли, в то время как спиральные формы с фекальным загрязнением не росли.
В этом тесте используется цитратный агар Симмонса для определения способности микроорганизма использовать цитрат в качестве единственного источника углерода и энергии. Агар содержит ионы цитрата и аммония (источник азота), а также бромтимоловый синий (BTB) в качестве индикатора pH. [2] Бромтимоловый синий был добавлен для уменьшения ложноположительных результатов. Цитратный агар зеленый до инокуляции и становится синим из-за BTB в качестве положительного индикатора теста, что означает, что используется цитрат. Тест также готовится на скошенной агаре для максимизации роста бактерий для еще лучшего указания использования цитрата.
Тесты IMViC полезны для дифференциации семейства Enterobacteriaceae , особенно при использовании вместе с уреазным тестом .
Результаты IMViC для некоторых важных видов показаны ниже. [3]
Разновидность | индол | Метиловый красный | Фогес-Проскауэр | Цитрат |
---|---|---|---|---|
Escherichia coli | Положительный | Положительный | Отрицательно | Отрицательно |
Золотистый стафилококк | Отрицательно | Положительный | Положительный | Отрицательно |
Шигеллы spp. [4] | Отрицательно | Положительный | Отрицательно | Отрицательно |
Сальмонелла spp. | Отрицательно | Положительный | Отрицательно | Положительный |
Клебсиелла spp. | Отрицательно | Отрицательно | Положительный | Положительный |
Протей обыкновенный [5] | Положительный | Положительный | Отрицательно | Отрицательно |
Протей чудесный | Отрицательно | Положительный | Отрицательно | Положительный |
Citrobacter freundii | Отрицательно | Положительный | Отрицательно | Положительный |
Энтеробактер аэрогенес | Отрицательно | Отрицательно | Положительный | Положительный |