Киназа гликогенсинтазы 3, каталитический домен | |
---|---|
Идентификаторы | |
Символ | STKc_GSK3 |
ИнтерПро | IPR039192 |
CDD | cd14137 |
гликогенсинтазы киназы 3 альфа | |||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|
Идентификаторы | |||||||
Символ | ГСК3А | ||||||
ген NCBI | 2931 | ||||||
HGNC | 4616 | ||||||
ОМИМ | 606784 | ||||||
РефСек | NM_019884 | ||||||
UniProt | Р49840 | ||||||
Другие данные | |||||||
Номер ЕС | 2.7.11.26 | ||||||
Локус | Хр. 19 q13.2 | ||||||
|
гликогенсинтазы киназы 3 бета | |||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|
Идентификаторы | |||||||
Символ | ГСК3Б | ||||||
ген NCBI | 2932 | ||||||
HGNC | 4617 | ||||||
ОМИМ | 605004 | ||||||
ПДБ | 1Q3W Больше структур | ||||||
РефСек | NM_002093 | ||||||
UniProt | Р49841 | ||||||
Другие данные | |||||||
Номер ЕС | 2.7.11.26 | ||||||
Локус | Хр. 3 кв. 13.33 | ||||||
|
Гликогенсинтазная киназа 3 ( GSK-3 ) — это серин/треониновая протеинкиназа , которая опосредует добавление молекул фосфата к остаткам аминокислот серина и треонина . Впервые обнаруженная в 1980 году как регуляторная киназа для своей одноименной гликогенсинтазы (GS), [2] GSK-3 с тех пор была идентифицирована как протеинкиназа для более чем 100 различных белков в различных путях. [3] [4] У млекопитающих, включая человека, GSK-3 существует в двух изоферментах, кодируемых двумя гомологичными генами GSK-3α ( GSK3A ) и GSK-3β ( GSK3B ). GSK-3 был предметом многих исследований, поскольку он был вовлечен в ряд заболеваний, включая диабет 2 типа , болезнь Альцгеймера , воспаление , рак , наркоманию [5] и биполярное расстройство .
GSK-3 — это серин/треониновая протеинкиназа, которая фосфорилирует либо треонин , либо серин , и это фосфорилирование контролирует различные биологические активности, такие как метаболизм гликогена , клеточную сигнализацию , клеточный транспорт и другие. [6] Ингибирование GS GSK-3β приводит к снижению синтеза гликогена в печени и мышцах, а также к повышению уровня глюкозы в крови или гипергликемии. [7] Вот почему GSK-3β связана с патогенезом и прогрессированием многих заболеваний, таких как диабет , ожирение , рак , [8] и болезнь Альцгеймера. [9] Она активна в покоящихся клетках и ингибируется несколькими гормонами, такими как инсулин , эндотелиальный фактор роста и тромбоцитарный фактор роста . Инсулин косвенно инактивирует GSK3 посредством нисходящего фосфорилирования специфических остатков серина Ser21 и Ser9 в изоформах GSK-3 α и β, соответственно, через путь PI3K/Akt . [10] [11]
По состоянию на 2019 год [обновлять]GSK-3 является единственным типом гликогенсинтазы киназы, который был назван и признан. Символы генов для GSK1 и GSK2 были отозваны Комитетом по номенклатуре генов HUGO (HGNC), и никаких новых названий для этих «генов» или их местоположений не было указано. [12] [13]
GSK-3 функционирует, фосфорилируя остаток серина или треонина на своем целевом субстрате. Положительно заряженный карман, прилегающий к активному сайту, связывает «прайминговую» фосфатную группу, прикрепленную к четырем остаткам серина или треонина C-конца целевого сайта фосфорилирования. Активный сайт, в остатках 181, 200, 97 и 85, связывает терминальный фосфат АТФ и переносит его в целевое место на субстрате (см. рисунок 1). [14]
Гликогенсинтаза — это фермент , который отвечает за синтез гликогена . Он активируется глюкозо-6-фосфатом (G6P) и ингибируется гликогенсинтазами киназами ( GSK3 ). Эти два механизма играют важную роль в метаболизме гликогена. [15]
Фосфорилирование белка GSK-3 обычно подавляет активность его последующей мишени. [16] [17] [18] GSK-3 активен в ряде центральных внутриклеточных сигнальных путей, включая клеточную пролиферацию, миграцию, регуляцию глюкозы и апоптоз.
GSK-3 был первоначально обнаружен в контексте его участия в регуляции гликогенсинтазы . [2] После активации казеинкиназой 2 (CK2) гликогенсинтаза фосфорилируется в кластере из трех остатков серина на С-конце, что снижает ее активность. [19] Помимо своей роли в регуляции гликогенсинтазы, GSK-3 участвует в других аспектах гомеостаза глюкозы, включая фосфорилирование инсулинового рецептора IRS1 [20] и глюконеогенных ферментов фосфоенолпируваткарбоксикиназы и глюкозо-6-фосфатазы . [21] Однако эти взаимодействия не были подтверждены, поскольку эти пути могут быть ингибированы без повышения регуляции GSK-3. [19]
Также было показано, что GSK-3 регулирует иммунные и миграционные процессы. GSK-3 участвует в ряде сигнальных путей врожденного иммунного ответа, включая выработку провоспалительных цитокинов и интерлейкинов. [22] [23] Инактивация GSK3B различными протеинкиназами также влияет на адаптивный иммунный ответ, вызывая выработку цитокинов и пролиферацию в наивных и запоминающих CD4+ T-клетках. [23] Сообщалось, что в клеточной миграции, неотъемлемом аспекте воспалительных реакций, ингибирование GSK-3 играет противоречивые роли, поскольку было показано, что локальное ингибирование в конусах роста способствует подвижности, в то время как глобальное ингибирование клеточного GSK-3, как было показано, ингибирует распространение и миграцию клеток. [22]
GSK-3 также неразрывно связан с путями пролиферации и апоптоза клеток. Было показано, что GSK-3 фосфорилирует бета-катенин , тем самым направляя его на деградацию. [24] Таким образом, GSK-3 является частью канонического пути бета-катенина / Wnt , который сигнализирует клетке о необходимости деления и пролиферации. GSK-3 фосфорилирует циклины D и E, которые важны для перехода из фазы G1 в фазу S, и вызывает их деградацию. Факторы транскрипции c-myc и c-fos (также промоторы фазы S), которые в первую очередь фосфорилируются киназой, регулируемой фосфорилированием тирозина с двойной специфичностью, также фосфорилируются GSK3, что приводит к их деградации. [25] GSK-3 также участвует в ряде апоптотических сигнальных путей, фосфорилируя факторы транскрипции, которые регулируют апоптоз . [4] GSK-3 может способствовать апоптозу как путем активации проапоптотических факторов, таких как p53 [26] , так и путем инактивации факторов, способствующих выживанию, посредством фосфорилирования. [27] Однако роль GSK-3 в регуляции апоптоза является спорной, поскольку некоторые исследования показали, что мыши с нокаутом GSK-3β чрезмерно сенсибилизированы к апоптозу и умирают на эмбриональной стадии, в то время как другие показали, что сверхэкспрессия GSK-3 может вызывать апоптоз. [28] В целом, GSK-3, по-видимому, как способствует, так и подавляет апоптоз, и эта регуляция варьируется в зависимости от конкретного молекулярного и клеточного контекста. [29]
GSK-3 также участвует в сигнальном пути ядерного транскрипционного активатора каппа B (NFκB), сигнальном пути Hedgehog, сигнальном пути Notch и эпителиально-мезенхимальном переходе. [25]
В связи с важностью для многочисленных клеточных функций активность GSK-3 строго регулируется и считается «тузом» среди киназ. [30]
Скорость и эффективность фосфорилирования GSK-3 регулируется несколькими факторами. Фосфорилирование определенных остатков GSK-3 может увеличивать или уменьшать его способность связывать субстрат. Фосфорилирование по тирозину-216 в GSK-3β или тирозину-279 в GSK-3α усиливает ферментативную активность GSK-3, в то время как фосфорилирование аутоингибиторного серина-9 в GSK-3β или серина-21 в GSK-3α значительно снижает доступность активного центра (см. рисунок). [22] Кроме того, GSK-3 необычна среди киназ тем, что ей обычно требуется «прайминг-киназа» для первого фосфорилирования субстрата. Фосфорилированный остаток серина или треонина, расположенный на четыре аминокислоты С-конца от целевого сайта фосфорилирования, позволяет субстрату связывать карман положительного заряда, образованный остатками аргинина и лизина. [19] [31]
В зависимости от пути, в котором он используется, GSK-3 может далее регулироваться клеточной локализацией или образованием белковых комплексов. Активность GSK-3 намного выше в ядре и митохондриях, чем в цитозоле в кортикальных нейронах, [32] в то время как фосфорилирование бета-катенина GSK-3 опосредовано связыванием обоих белков с Axin , белком-каркасом, что позволяет бета-катенину получить доступ к активному сайту GSK-3. [22]
Инсулин косвенно инактивирует GSK3 посредством нисходящего фосфорилирования специфических остатков серина Ser21 и Ser9 в изоформах GSK-3 α и β соответственно через путь PI3K/Akt (протеинкиназа B). [10] [11]
Из-за своего участия в большом количестве сигнальных путей, GSK-3 был связан с множеством громких заболеваний. Ингибиторы GSK-3 в настоящее время тестируются на предмет терапевтических эффектов при болезни Альцгеймера , сахарном диабете 2 типа (СД2), некоторых формах рака и биполярном расстройстве . [33]
Существуют доказательства того, что литий , который используется для лечения биполярного расстройства , действует как стабилизатор настроения, избирательно ингибируя GSK-3. Механизм, посредством которого ингибирование GSK-3 может стабилизировать настроение, неизвестен, хотя предполагается, что ингибирование способности GSK-3 способствовать воспалению способствует терапевтическому эффекту. [22] Ингибирование GSK-3 также дестабилизирует транскрипционный репрессор Rev-ErbA alpha, который играет важную роль в циркадных часах. [34] Элементы циркадных часов могут быть связаны с предрасположенностью к биполярному расстройству настроения. [35]
Активность GSK-3 связана как с патологическими признаками болезни Альцгеймера, а именно с накоплением отложений амилоида-β (Aβ), так и с образованием нейрофибриллярных клубков . Считается, что GSK-3 напрямую стимулирует выработку Aβ и связан с процессом гиперфосфорилирования тау -белков , что приводит к образованию клубков. [4] [22] Благодаря этим ролям GSK-3 в развитии болезни Альцгеймера, ингибиторы GSK-3 могут оказывать положительное терапевтическое воздействие на пациентов с болезнью Альцгеймера и в настоящее время находятся на ранних стадиях тестирования. [36]
Аналогичным образом, целенаправленное ингибирование GSK-3 может иметь терапевтический эффект на некоторые виды рака. Хотя было показано, что GSK-3 способствует апоптозу в некоторых случаях, также сообщалось, что он является ключевым фактором в онкогенезе при некоторых видах рака. [37] Подтверждая это утверждение, было показано, что ингибиторы GSK-3 вызывают апоптоз в клетках глиомы и рака поджелудочной железы. [28] [38] GSK-3 также, по-видимому, отвечает за аберрантную активность NFκB при остром лимфобластном лейкозе у детей и клетках рака поджелудочной железы. В клетках рака почки ингибиторы GSK-3 вызывают остановку клеточного цикла, дифференциацию злокачественных клеток и аутофагию. В отличие от вышеуказанных новообразований, высокая экспрессия неактивного pGSK3β-S9 обнаружена при раке кожи, полости рта и легких, что предполагает подавляющее опухоль действие фермента при этих видах рака. При меланоме микроРНК miR-769 ингибирует активность GSK-3 в процессе развития опухоли, что также указывает на подавляющее опухоль действие GSK3. [25]
Ингибиторы GSK-3 также показали свою эффективность в лечении СД2. [19] Хотя активность GSK-3 при диабетических состояниях может радикально различаться в разных типах тканей, исследования показали, что введение конкурентных ингибиторов GSK-3 может повысить толерантность к глюкозе у мышей с диабетом. [22] Ингибиторы GSK-3 также могут оказывать терапевтическое воздействие на геморрагическую трансформацию после острого ишемического инсульта. [39] GSK-3 может негативно регулировать сигнальный путь инсулина, ингибируя IRS1 посредством фосфорилирования серина-332, [20] делая рецептор инсулина неспособным активировать IRS1 и далее инициировать канонический путь PI3K/Akt. Роль, которую ингибирование GSK-3 может играть в других его сигнальных ролях, пока не полностью изучена.
Ингибирование GSK-3 также опосредует увеличение транскрипции фактора транскрипции Tbet (Tbx21) и ингибирование транскрипции ингибиторного корецептора программируемой клеточной смерти-1 (PD-1) на Т-клетках. [40] Ингибиторы GSK-3 увеличили in vivo функцию CD8(+) OT-I CTL и устранение вирусных инфекций, вызванных мышиным гамма-герпесвирусом 68 и лимфоцитарным хориоменингитом клона 13, а также анти-PD-1 в иммунотерапии.
Ингибиторы гликогенсинтазы киназы имеют различные хемотипы и различные механизмы действия; они могут быть катионами , из природных источников, синтетическими ингибиторами АТФ и не-АТФ конкурентными ингибиторами и ингибиторами, конкурентными по субстрату. GSK3 представляет собой двухдолевую архитектуру с N-концом и C-концом , N-конец отвечает за связывание АТФ, а C-конец, который называется активационной петлей, опосредует активность киназы, тирозин, расположенный на C-конце, необходим для полной активности GSK3. [41]
При диабете ингибиторы GSK-3β повышают чувствительность к инсулину, синтез гликогена и метаболизм глюкозы в скелетных мышцах, а также снижают ожирение, влияя на процесс адипогенеза . [42] GSK-3β также сверхэкспрессируется при нескольких типах рака, таких как колоректальный , яичниковый и рак простаты . [41] Ингибиторы GSK-3β также помогают в лечении болезни Альцгеймера , [ требуется цитирование ] инсульта , [39] и расстройств настроения , включая биполярное расстройство . [43] Исследования in vitro показали благоприятное воздействие ингибиторов GSK-3 при раке легких, [44] раке яичников [45] и нейробластоме. [46]
Ингибиторы GSK-3 включают: [47] [48] [49] [50]
IC50 =4-80нМ :
IC50 =0,5-1,5 мкМ :
Литий, который используется при лечении биполярного расстройства , был первым обнаруженным естественным ингибитором GSK-3. Он ингибирует GSK-3 напрямую, конкурируя с ионами магния, и косвенно, фосфорилируя и саморегулируя серин. Было обнаружено, что литий оказывает инсулиноподобное действие на метаболизм глюкозы, включая стимуляцию синтеза гликогена в жировых клетках, коже и мышцах, увеличивая усвоение глюкозы и активируя активность GS. Помимо ингибирования GSK-3, он также ингибирует другие ферменты, участвующие в регуляции метаболизма глюкозы, такие как мио-инозитол-1-монофосфатаза и 1,6-бисфосфатаза. Кроме того, он показал терапевтическую пользу при болезни Альцгеймера и других нейродегенеративных заболеваниях, таких как эпилептическая нейродегенерация. [49]
Напроксен — нестероидный противовоспалительный препарат , а кромолин — противоаллергический препарат , действующий как стабилизатор тучных клеток . Оба препарата продемонстрировали противораковый эффект в дополнение к гипогликемическому эффекту за счет ингибирования гликогенсинтазы киназы-3β (GSK-3β).
Для подтверждения гипотезы анти-GSK-3β напроксена и кромолина была проведена стыковка двух структур с карманом связывания GSK-3β и сравнение их соответствия с известным ингибитором GSK-3β ARA014418, в дополнение к измерению уровня глюкозы в сыворотке, инсулина в сыворотке, C-пептида в сыворотке, колебаний веса и уровней гликогена в печени для моделей нормальных и диабетических голодающих животных для оценки их гипогликемических эффектов in vitro. [ необходима ссылка ]
Напроксен и кромолин были успешно пристыкованы к сайту связывания GSK-3β (оба были помещены в его карман связывания). Они продемонстрировали электростатические, гидрофобные и водородные связи с ключевыми аминокислотами в кармане связывания с профилями связывающего взаимодействия, аналогичными AR-A014418 (известный ингибитор). Отрицательные заряды групп карбоновых кислот в обоих препаратах взаимодействуют электростатически с положительно заряженной гуанидиновой группой Arg141. Более того, взаимодействия водородных связей между группами карбоновых кислот кромолина и аммониевыми группами Lys183 и Lys60, в дополнение к π-укладке нафталиновой кольцевой системы напроксена с фенольным кольцом Tyr134.
Антидиабетические эффекты напроксена и кромолина: в нормальных моделях животных оба препарата показали дозозависимое снижение уровня глюкозы в крови и повышение уровня гликогена. В хронической модели диабета II типа уровни глюкозы также были снижены, а уровни гликогена и инсулина были повышены дозозависимым образом со снижением уровня глюкозы в плазме. [ необходима цитата ]
Эффекты напроксена и кромолина против ожирения: Оба препарата показали значительный эффект против ожирения, поскольку они снижают вес тела, резистин и уровень глюкозы в зависимости от дозы. Было также обнаружено, что они повышают уровни адипонектина , инсулина и С-пептида в зависимости от дозы. [42]
Фамотидин — специфический антагонист H2- рецепторов длительного действия , снижающий секрецию желудочной кислоты. Он используется при лечении язвенной болезни, ГЭРБ и патологических гиперсекреторных состояний, таких как синдром Золлингера–Эллисона. (14,15) Антагонисты H2-рецепторов влияют на метаболизм гормонов, но их влияние на метаболизм глюкозы не установлено. (16) Исследование показало, что фамотидин обладает эффектом снижения уровня глюкозы. [ необходима цитата ]
Изучение связывания фамотидина с ферментом показало, что фамотидин может быть закреплен в кармане связывания GSK-3β, создавая значительные взаимодействия с ключевыми точками в кармане связывания GSK-3β. Сильные взаимодействия водородных связей с ключевыми аминокислотами PRO-136 и VAL -135 и потенциальное гидрофобное взаимодействие с LEU-188 были аналогичны тем, которые были обнаружены при связывании лиганда с ферментом (AR-A014418). [ необходима цитата ]
Кроме того, фамотидин показал высокую связывающую способность GSK-3β и ингибирующую активность из-за взаимодействий, которые стабилизируют комплекс, а именно водородное связывание гуанидиновой группы в фамотидине с сульфагидрильной частью в CYS-199; и электростатические взаимодействия между той же гуанидиновой группой с карбоксильной группой в ASP-200, водородная связь между терминальной группой NH2, OH TYR-143 и гидрофобное взаимодействие атома серы в тиоэфире с ILE-62. Исследования in vitro показали, что фамотидин ингибирует активность GSK-3β и увеличивает запасы гликогена в печени дозозависимым образом. Было отмечено четырехкратное увеличение уровня гликогена в печени при использовании максимальной дозы фамотидина (4,4 мг/кг). Также было показано, что фамотидин снижает уровень глюкозы в сыворотке через 30 и 60 минут после пероральной нагрузки глюкозой у здоровых людей. [51]
Куркумин, входящий в состав специи куркума , обладает вкусовыми и красящими свойствами. [52] Он имеет две симметричные формы: енольную (наиболее распространенную форму) и кетонную. [53] [54]
Куркумин обладает широким спектром фармакологических свойств: противовоспалительным, [55] противомикробным, [56] гипогликемическим, антиоксидантным и ранозаживляющим действием. [57] В животных моделях с болезнью Альцгеймера он оказывает антидеструктивное действие на бета-амилоид в мозге, [58] а недавно он продемонстрировал противомалярийную активность. [59]
Куркумин также обладает профилактическим химиотерапевтическим и противораковым действием [ необходима ссылка ] и, как было показано, ослабляет окислительный стресс и почечную дисфункцию у животных, больных диабетом, при хроническом применении. [60]
Механизм действия куркумина – противовоспалительный; он ингибирует ядерный транскрипционный активатор каппа B ( NF-KB ), который активируется всякий раз, когда возникает воспалительная реакция. [ необходима цитата ]
NF-kB имеет два регуляторных фактора, IkB и GSK-3, [61] что предполагает, что куркумин напрямую связывает и ингибирует GSK-3B. Исследование in vitro подтвердило ингибирование GSK-3B путем моделирования молекулярной стыковки с использованием техники силико-стыковки. [62] Концентрация, при которой 50% GK-3B будет ингибироваться куркумином, составляет 66,3 нМ. [62]
Экспериментальные и теоретические исследования показывают, что среди двух его форм енольная форма является предпочтительной из-за ее внутримолекулярной водородной связи, а эксперимент ЯМР показывает, что енольная форма существует в различных растворителях. [ необходима цитата ]
Антипсихотические препараты все чаще используются при шизофрении , биполярном расстройстве, тревожности и других психиатрических состояниях [63]. Атипичные антипсихотики используются чаще, чем антипсихотики первого поколения, поскольку они снижают риск экстрапирамидных симптомов, таких как поздняя дискинезия , и обладают большей эффективностью. [64]
Оланзапин и атипичные антипсихотики вызывают увеличение веса за счет увеличения жировых отложений. [65] Он также влияет на метаболизм глюкозы, и несколько исследований показывают, что он может ухудшить течение диабета. [66]
Недавнее исследование показывает, что оланзапин подавляет активность GSK3, что предполагает, что оланзапин позволяет синтезировать гликоген. Исследование влияния оланзапина на уровень глюкозы и гликогена в крови мышей показало значительное снижение уровня глюкозы в крови и повышение уровня гликогена у мышей, а IC50% оланзапина составил 91,0 нм, что считается мощным ингибитором. Исследование также иллюстрирует, что субхроническое использование оланзапина приводит к мощному ингибированию GSK3. [43]
Аналоги пиримидина являются антиметаболитами, которые мешают синтезу нуклеиновых кислот. [67] Было показано, что некоторые из них подходят для связывания АТФ с GSK-3β, что снижает уровень глюкозы в крови и улучшает состояние при некоторых нейронных заболеваниях. [68]