Глюкозо-фосфатный бульон
 | Эта статья не содержит достаточного контекста для тех, кто не знаком с предметом . ( Май 2018 ) |
Эта статья в значительной степени или полностью основана на одном источнике . ( июнь 2023 г. ) |
Глюкозо-фосфатный бульон используется для проведения теста с метиловым красным (МР) и теста Фогеса-Проскауэра (ВП).
Содержание
- Глюкоза – 5 г/л
- Дикалийфосфат – 5 г/л
- Протеозопептон – 5 г / л
- Дистиллированная вода – 1000 мл
рН – 6,9
Тест с метиловым красным
Принцип
Он используется для определения способности организма вырабатывать смешанные кислоты путем ферментации глюкозы и преодолевать буферную емкость среды.
Процедура
Инокулируйте MacConkey's (глюкозо-фосфатный бульон) чистой культурой тестируемого организма. Инкубируйте бульон при температуре 35 °C в течение 48–72 часов.
После инкубации добавьте 5 капель метилового красного непосредственно в бульон через стенки пробирки.
Интерпретация
Развитие устойчивого красного цвета на поверхности среды указывает на достаточное производство кислоты для снижения pH до 4,4 и представляет собой положительный тест. Поскольку другие организмы могут производить меньшее количество кислоты из тестового субстрата , может развиться промежуточный оранжевый цвет между желтым и красным. Это не указывает на положительный тест.
Управление
Положительный и отрицательный контроль следует проводить после приготовления каждой партии среды.
Положительный контроль: Escherichia coli
Отрицательный контроль: клебсиелла
тест Фогеса-Проскауэра
Принцип
Он используется для определения способности некоторых организмов производить нейтральный конечный продукт, ацетилметилкарбинол ( ацетоин ) из ферментации глюкозы. Производство ацетоина, нейтрального конечного продукта реакции, производимого такими членами, как Klebsiella , Enterobacter и т. д., является главным конечным продуктом метаболизма глюкозы и образует меньшее количество смешанных кислот. В присутствии атмосферного кислорода и 40% KOH ацетоин превращается в диацетил , а α-нафтол служит катализатором для получения красного цветного комплекса.
СМИ
Глюкозо-фосфатный бульон
Реагенты
А: α-нафтол – 5 г
- Спирт этиловый абсолютный – 100 мл – 0,6 мл – 3 части
- Б: КОН – 40 г
- Дистиллированная вода – 100 мл – 0,2 мл – 1 часть
Процедура
Инокулируйте пробирку с глюкозо-фосфатным бульоном чистым инокулятом тестового организма и инкубируйте при температуре 35 °C в течение 24 часов.
К 1 мл этого бульона добавьте 0,6 мл 5% α-нафтола, а затем 0,2 мл 40% KOH. Осторожно встряхните пробирку, чтобы среда подверглась воздействию атмосферного кислорода, и оставьте пробирку в покое на 10–15 минут.
Интерпретация
Положительный тест представлен развитием красного цвета через 15 минут или более после добавления реагентов , что указывает на присутствие диацетила, продукта окисления ацетоина. Тест должен быть красным после стояния в течение 1 часа, поскольку отрицательные культуры VP могут давать медный цвет, потенциально приводящий к ложноположительной интерпретации, также из-за действия реагентов при смешивании.
Управление
Положительный и отрицательный контроль следует проводить после приготовления каждой партии среды.
Положительный контроль: клебсиелла
Отрицательный контроль: Escherichia coli [1]
Ссылки
- ^ Руководство Майера и Коши по диагностическим процедурам в медицинской микробиологии и иммунологии. Веллор, Индия: Христианский медицинский колледж и больница. 2001.
