Агар с тиосульфатом, цитратом, желчными солями и сахарозой

Агар с тиосульфатом, цитратом, желчными солями и сахарозой , или агар TCBS , представляет собой тип селективной агаровой культуральной пластины, которая используется в микробиологических лабораториях для выделения видов Vibrio ^{. [1]} Агар TCBS высокоселективен для выделения V. cholerae и V. parahaemolyticus, а также других видов Vibrio . Помимо агара TCBS, в эндемичных районах, таких как Азия, Африка и Латинская Америка, также используются другие экспресс-тесты, такие как иммунохроматографические тест-полоски. Хотя для подтверждения требуется исследование на агаре TCBS. Это становится чрезвычайно важным в случаях гастроэнтерита, вызванного видами Campylobacter , симптомы которого напоминают симптомы холеры. Поскольку на агаре TCBS не наблюдается роста желтых бактерий в случае видов Campylobacter , можно устранить вероятность неправильной диагностики. Агар TCBS содержит высокие концентрации тиосульфата натрия и цитрата натрия для подавления роста Enterobacteriaceae . Ингибирование грамположительных бактерий достигается путем включения бычьей желчи , которая является природным веществом, содержащим смесь желчных солей и холата натрия , чистой желчной соли . Тиосульфат натрия также служит источником серы , и его присутствие в сочетании с цитратом железа позволяет легко обнаружить выработку сероводорода . Сахароза ( сахароза ) включена в качестве ферментируемого углевода для метаболизма видов Vibrio . Щелочной pH среды усиливает восстановление V. cholerae и подавляет рост других. Тимоловый синий и бромтимоловый синий включены в качестве индикаторов изменений pH. ^[2]

Приблизительное количество на литр ^[3]

• Дрожжевой экстракт 5,0 г
• Протеозопептон 10,0 г
• Тиосульфат натрия 10,0 г
• Цитрат натрия 10,0 г
• Бычья желчь 5,0 г
• Холат натрия 3,0 г
• Сахароза 20,0 г
• Натрия хлорид 10,0 г
• Цитрат железа 1,0 г
• Бромтимоловый синий 0,04 г
• Тимоловый синий 0,04 г
• Агар 15,0 г

рН 8,6 ± 0,2 при 25 °С

Типичная морфология колонии ^{[2] [4]}

• V. cholerae : Крупные желтые колонии.
• V. parahaemolyticus : колонии с сине-зелеными центрами.
• V. alginolyticus : Крупные желтые слизистые колонии.
• V. harveyi / V. fischeri : колонии от серо-зеленого до голубовато-зеленого цвета, которые люминесцируют в темноте. Более старые колонии не показывают биолюминесценцию.
• Proteus / Enterococci : Частичное ингибирование. Если есть рост, колонии маленькие и желтые или полупрозрачные.
• Pseudomonas / Aeromonas : Частичное ингибирование. Если есть рост, колонии синие.

Бактерии, которые не являются вибрионами , но производят сероводород, растут в виде небольших черных колоний. Это происходит потому, что сероводород, полученный из тиосульфата, который действует как источник серы и создает пониженное напряжение кислорода, в котором вибрионы могут расти из-за своей факультативной анаэробной природы, соединяется с ионами железа из цитрата железа, образуя сульфид железа, который имеет черный цвет.

Агар TCBS является как селективным, так и дифференциальным. Он высокоселективен для видов Vibrio и дифференциальн из-за присутствия сахарозы и красителей. Ферментация сахарозы производит кислоту, которая преобразует цвет бромтимолового синего или тимолового синего. Два красителя вместо одного заставляют среду производить массив желтого, зеленого или синего, так что дифференциация между различными видами Vibrio возможна.

Агар TCBS также использовался для контроля вспышек морской звезды терновый венец ( Acanthaster planci ), которая представляет угрозу для коралловых рифов. Единичные инъекции приводят к гибели морских звезд в течение 24 часов с симптомами «обесцвеченной и некротической кожи, язв, потери тургора тела, накопления бесцветной слизи на многих шипах, особенно на их кончиках, и потери шипов. Пузыри на спинном покрове прорывали поверхность кожи и приводили к большим открытым язвам, обнажающим внутренние органы». Это было связано с содействием росту естественных видов Vibrio до высокой плотности с последующим дисбалансом симбионтов. ^[5]