Нефтяная микробиология — это раздел микробиологии , который занимается изучением микроорганизмов , которые могут метаболизировать или изменять сырую или очищенную нефть . Эти микроорганизмы, также называемые углеводородокластическими микроорганизмами, могут разлагать углеводороды и включают в себя широкое распространение бактерий, метаногенных архей и некоторых грибов . Не все углеводородокластические микробы зависят от углеводородов для выживания, но вместо этого могут использовать нефтепродукты в качестве альтернативных источников углерода и энергии. Интерес к этой области растет из-за все более широкого использования биоремедиации нефтяных разливов . [1] [2] [3]
Биоремедиация загрязненных нефтью почв, морских вод и масляных шламов на месте является осуществимым процессом, поскольку микроорганизмы, разлагающие углеводороды, распространены повсеместно и способны разлагать большинство соединений в нефтяном масле. В простейшем случае местные микробные сообщества могут разлагать нефть в месте разлива. В более сложных случаях могут применяться различные методы добавления питательных веществ, воздуха или экзогенных микроорганизмов на загрязненный участок. [4] Например, биореакторы включают применение как естественных, так и дополнительных микроорганизмов в контролируемых условиях роста, что обеспечивает высокие показатели биодеградации и может использоваться с широким спектром сред. [4]
Сырая нефть состоит из множества химических соединений, второстепенных компонентов и следов металлов. 50-98% этих нефтепродуктов составляют углеводороды с насыщенными, ненасыщенными или ароматическими структурами, которые влияют на их биоразлагаемость гидронокарбокластами. [5] Скорость поглощения и биоразложения этими углеводородокисляющими микробами зависит не только от химической структуры субстратов, но и ограничивается биотическими и абиотическими факторами, такими как температура, соленость и доступность питательных веществ в окружающей среде. [6] [7]
Модельным микроорганизмом, изучаемым на предмет его роли в биоремедиации мест разливов нефти и катаболизма углеводородов, является альфа-протеобактерия Alcanivorax , которая разлагает алифатические алканы посредством различных метаболических активностей. [6] Alcanivorax borkumensis использует линейные углеводородные цепи в нефти в качестве основного источника энергии в аэробных условиях. При дальнейшем снабжении достаточным количеством ограничивающих питательных веществ, таких как азот и фосфор, он растет и производит поверхностно-активные глюколипиды, помогающие снизить поверхностное натяжение воды и улучшить поглощение углеводородов. [5] По этой причине нитраты и фосфаты часто добавляются в коммерческих целях на места разливов нефти для привлечения покоящейся популяции A. borkumensis , что позволяет им быстро вытеснять другие микробные популяции и становиться доминирующим видом в среде, зараженной нефтью. [8] [9]
Добавление ограничивающих скорость питательных веществ стимулирует пути биодеградации микроба, включая повышение регуляции генов, кодирующих множественные алкангидроксилазы, которые окисляют линейные алканы различной длины. [10] Эти ферменты по существу удаляют проблемные углеводородные компоненты нефтяного масла, в то время как A. borkumensis одновременно увеличивает синтез анионных глюкопротеинов, которые используются для эмульгирования углеводородов в окружающей среде и повышения их биодоступности. [10] Присутствие сырой нефти вместе с соответствующими уровнями азота и фосфора катализирует удаление нефти либо с помощью механизмов, которые повышают эффективность поглощения субстрата, либо путем прямой биодеградации алифатических цепей.
Два известных разлива нефти являются примерами крупномасштабного применения морской биоремедиации:
В 1989 году танкер Exxon Valdez сел на мель, разлив 41,6 млн литров сырой нефти и запустив одну из первых крупных попыток биоремедиации после разлива нефти. Очистка береговой линии Аляски частично основывалась на применении удобрений для усиления роста бактерий. [11]
В 2010 году разлив нефти BP Deepwater Horizon привел к выбросу 779 миллионов литров нефти в Мексиканский залив. Это был крупнейший разлив нефти за всю историю, и местные нефтяные микроорганизмы сыграли важную роль в разложении нефти и очистке. [12]
Это синтезированные микробами поверхностно-активные вещества , которые позволяют более эффективно проводить микробную биодеградацию углеводородов в процессах биоремедиации. Биосурфактанты участвуют в биоремедиации двумя способами. (1) Увеличивают площадь поверхности гидрофобных водонерастворимых субстратов. Рост микробов на углеводородах может быть ограничен доступной площадью поверхности на границе раздела вода-нефть. Эмульгаторы, вырабатываемые микробами, могут разбивать нефть на более мелкие капли, эффективно увеличивая доступную площадь поверхности. (2) Увеличивают биодоступность гидрофобных водонерастворимых субстратов. Биосурфактанты могут повышать доступность связанных субстратов путем их десорбции с поверхностей (например, почвы) или путем увеличения их кажущейся растворимости. Некоторые биосурфактанты имеют низкие критические концентрации мицелл (ККМ), свойство, которое увеличивает кажущуюся растворимость углеводородов путем секвестрации гидрофобных молекул в центрах мицелл . [ 13]
Микробное повышение нефтеотдачи (MEOR) — это технология, в которой микробная среда подвергается манипуляциям для повышения нефтеотдачи. Питательные вещества вводятся in situ в пористые среды, а местные или добавленные микробы способствуют росту и/или вырабатывают продукты, которые мобилизуют нефть в добывающие скважины. В качестве альтернативы, нефтемобилизующие продукты могут быть получены путем ферментации и закачаны в резервуар. Различные продукты и микроорганизмы полезны в этих приложениях, и каждый из них даст разные результаты. Две общие стратегии повышения нефтеотдачи — это изменение поверхностных свойств интерфейса и использование биологического засорения для изменения поведения потока. [14] Биомасса , биосурфактанты , биополимеры , растворители , кислоты и газы — вот некоторые из продуктов, которые добавляются в нефтяные резервуары для повышения нефтеотдачи. [4] Другие ресурсы для этого приложения: [15] [16]
Микробные биосенсоры идентифицируют и количественно определяют целевые соединения, представляющие интерес, посредством взаимодействия с микробами. Например, бактерии могут использоваться для идентификации загрязняющего вещества путем мониторинга их реакции на определенное химическое вещество. Биосенсорная система может просто использовать рост бактерий в качестве индикатора загрязняющего вещества или полагаться на генетические анализы , в которых репортерный ген индуцируется химическим веществом.
Многие аналитические методы требуют дорогостоящей обработки образцов почвы и/или дорогостоящего оборудования для обнаружения присутствия загрязняющих веществ. Бактериальные биосенсорные системы предлагают потенциал для дешевых, надежных систем обнаружения, которые являются селективными и высокочувствительными. Одна из разработанных систем использует Pseudomonas fluorescens HK44 для количественного анализа нафталина с использованием биолюминесценции . [17]
Часто в процессе разложения загрязняющего вещества микроб может создавать промежуточные или побочные продукты , которые также вредны, иногда даже более вредны, чем исходный субстрат . Например, некоторые микробы производят сероводород в качестве побочного продукта при разложении определенных нефтяных углеводородов, и если эти газы не детоксифицируются перед выходом из системы, они могут быть выброшены в атмосферу. [18]
Пути деградации различных нефтепродуктов различаются в зависимости от субстрата и микроорганизма (т. е. аэробные/анаэробные). Конкретные пути деградации многих углеводородных соединений можно найти в базе данных биокатализа/биодеградации Университета Миннесоты.