НейтрАвидин

Белок Neutralite Avidin представляет собой дегликозилированную версию куриного авидина с массой приблизительно 60 000 дальтон . В результате удаления углеводов связывание лектина снижается до неопределяемых уровней, однако сродство связывания биотина сохраняется, поскольку углевод не является необходимым для этой активности. Авидин имеет высокий pI, но NeutrAvidin имеет почти нейтральный pI (pH 6,3), что сводит к минимуму неспецифические взаимодействия с отрицательно заряженной поверхностью клетки или с ДНК/РНК. Нейтравидин все еще имеет остатки лизина , которые остаются доступными для дериватизации или конъюгации .

Как и сам авидин, NeutrAvidin представляет собой тетрамер с сильным сродством к биотину ( K d = 10 −15 M). В биохимических приложениях стрептавидин , который также очень прочно связывается с биотином, может использоваться взаимозаменяемо с NeutrAvidin.

Авидин, иммобилизованный на твердых носителях, также используется в качестве очищающей среды для захвата молекул белка или нуклеиновой кислоты, меченных биотином . Например, белки клеточной поверхности могут быть специфически помечены мембранно-непроницаемым биотиновым реагентом , а затем специфически захвачены с использованием носителя NeutrAvidin.

Ссылки

  • Байер, Эд: «Система авидин-биотин», Кафедра биологической химии, Институт Вейцмана, Израиль
  • Y. Hiller, JM Gershoni, EA Bayer, M. Wilchek (1987), «Связывание биотина с авидином. Боковая цепь олигосахарида не требуется для ассоциации лиганда», Biochemical Journal , т. 248, № 1, стр. 167–171, doi : 10.1042/bj2480167, PMC  1148514 , PMID  3435435{{citation}}: CS1 maint: multiple names: authors list (link)
  • Эдвард А. Байер, Фабьен Де Мейстер, Тиква Кулик, Меир Вильчек (1995), «Получение дегликозилированного авидина яичного белка», Прикладная биохимия и биотехнология , т. 53, № 1, стр. 1–9, doi : 10.1007/BF02783477, PMID  7625822{{citation}}: CS1 maint: multiple names: authors list (link)
  • Ари Т. Марттила, Олли Х. Лайтинен, Кари Дж. Айренне, Тиква Кулик, Эдвард А. Байер, Меир Вильчек, Маркку С. Куломаа (2000), «Рекомбинантный авидин NeutraLite: негликозилированный, кислый мутант куриного авидина, который проявляет высокое сродство к биотину и низкие неспецифические связывающие свойства», FEBS Letters , т. 467, № 1, стр. 31–36, Bibcode : 2000FEBSL.467...31M, doi : 10.1016/S0014-5793(00)01119-4, PMID  10664451{{citation}}: CS1 maint: multiple names: authors list (link)


Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=NeutrAvidin&oldid=1223525029"