Калькофлуор-белый
| Имена | |
|---|---|
| Название ИЮПАК динатрий 2,2'-этен-1,2-диилбис[5-({4-анилино-6-[бис(2-гидроксиэтил)амино]-1,3,5-триазин-2-ил}амино)бензолсульфонат] | |
| Другие имена Флуоресцентный отбеливатель 28, Calcofluor White M 2R | |
| Идентификаторы | |
| |
3D модель ( JSmol ) |
|
| ЧЭБИ |
|
| ChemSpider |
|
| Информационная карта ECHA | 100.021.885 |
CID PubChem |
|
Панель инструментов CompTox ( EPA ) |
|
| |
| |
| Характеристики | |
| С40Н42Н12Nа2О10S2 | |
| Молярная масса | 960,95 г·моль −1 |
Если не указано иное, данные приведены для материалов в стандартном состоянии (при 25 °C [77 °F], 100 кПа). | |
Calcofluor-white или CFW — флуоресцентный синий краситель, используемый в биологии и текстильной промышленности. Он связывается с 1–3 бета и 1–4 бета полисахаридами хитина и целлюлозы , которые присутствуют в клеточных стенках грибов, растений и водорослей. В исследованиях биологии растительных клеток он используется для окрашивания клеточных стенок как водорослей , так и высших растений . [1] [2] Он также полезен в медицине и биологии животных как чувствительный инструмент для визуализации и идентификации грибов в тканях . [1] [3]
Использование
Лекарство
CFW можно использовать как в клинической микологии, так и в паразитологии. Свободноживущие амебы в глазных видах могут иметь цисты, которые можно наглядно увидеть с помощью окраски. [4] CFW можно использовать с окраской по Папаниколау, чтобы усилить реакцию дрожжей в мазках по Папаниколау. [5]
Исследовать
В исследованиях калькофлуор-белый также используется для окрашивания почечных рубцов дрожжевых клеток, поскольку почечные рубцы имеют более высокое содержание хитина, который окрашивает их больше, чем остальную часть клеточной мембраны. Благодаря этому красителю можно подсчитать почечные рубцы, что является показателем возраста клетки. Он показывает похожие картины окрашивания, как агглютинин зародышей пшеницы (WGA), который связывает N-ацетилглюкозамин и сиаловую кислоту на полисахаридах. Он особенно полезен для идентификации Mucor и возбудителей зигомикоза . Калькофлуор-белый можно использовать для окрашивания текальных пластинок у панцирных динофлагеллятов . [6]
Текстиль
CFW — это краситель для отбеливания тканей. Он водорастворим и бесцветен на первый взгляд. Он обладает эффектом оптического отбеливания, который используется с 1940-х годов для придания более белого вида тканям. Он также добавляется в стиральные порошки в коммерческих целях в качестве отбеливателя. [7]
Флуоресценция
Водные растворы для калькофлюор-белого имеют спектр поглощения от 300 до 412 нм с пиком при 347 нм. Пик флуоресценции лучше всего проявляется при ультрафиолетовом свете , но фиолетовый/сине-фиолетовый также дает отличные результаты флуоресценции. Калькофлюор-белый — это флуоресцентный краситель , то есть у него длина волны возбуждения и испускания, которые отличаются друг от друга. Длина волны возбуждения составляет 380 нм, а испускания — 475 нм. Флуоресценцию лучше всего наблюдать при ультрафиолетовом свете, но ее также можно наблюдать при фиолетовом или сине-фиолетовом.
Грибы имеют тенденцию демонстрировать яркий зеленый цвет под УФ/фиолетовым/фиолетово-синим светом из-за барьерных фильтров, используемых в микроскопии для флуоресценции. Калькофлюор белый требует осторожной интерпретации окрашивания, так как некоторые неспецифические реакции могут сделать фон флуоресцентным желто-зеленым цветом. Это можно уменьшить, рассматривая клетки под синим светом или с другими фильтрами, чтобы увидеть наилучшее возможное изображение. Синий Эванса является контрастным красителем для Калькофлюора белого, так как он может помочь уменьшить фоновые ткани и клетки с синим светом. [8]
Сравнительные исследования
В сравнительном исследовании гидроксида калия (KOH), Calcofluor-White и грибковых культур для диагностики грибкового онихомикоза CFW рассматривался как наиболее чувствительный метод обнаружения инфекции у людей. Исследование показало, что из 150 пациентов CFW показал положительный результат у 95 из них. Исследование также рассмотрело основные преимущества использования красителя Calcofluor-White по сравнению с KOH. В нем обсуждалось, что CFW требует быстрого времени скрининга, поскольку его можно увидеть на объективах с низким увеличением и можно выполнить в течение минуты, в то время как KOH требует около 3–4 минут для каждого слайда. Это более быстрый и чувствительный метод скрининга, чем KOH, и фоновый материал можно отвести с помощью CFC. [ необходима цитата ]
В исследовании методов диагностики микозов, грибковых инфекций у людей, CFW сравнивали с KOH и Chicago Sky Blue 6B. CFW показал положительный результат в 53,4% случаев, когда подозревали микозные инфекции, в то время как точность Chicago Sky Blue 6B составила 55%. Исследование показало, что CFW менее эффективен для быстрого обнаружения по сравнению с Chicago Sky Blue 6B, но это эффективный способ обнаружения грибковой инфекции. [5]
Исследование, в котором изучалось обнаружение Candida в раковых или предраковых поражениях с использованием CFW с флуоресцентной микроскопией. Исследование хотело увидеть эффективность Calcofluor-White против вида грибковых инфекций, которые могут привести к смерти или серьезным травмам у пациентов с ослабленным иммунитетом. Также изучалась чувствительность красителя по сравнению с окрашиванием по Граму и PAS. Исследование пришло к выводу, что это быстрый и простой способ диагностики в цитопатологии и гистопатологии, но он относительно дорогой. Исследование также показало, что не требуется никаких специальных методов, чтобы сделать окрашивание эффективным. Краситель также не мешает окрашиванию по PAS или Граму. Для цитологии Pap-CFW дал положительный ответ 50 из 135 раз, а для гистопатологии он дал положительный ответ 43 из 135 только для окрашивания CFW. Исследование показало, что окрашивание улучшилось при сочетании Pap и CFW. Результаты показали, что краситель оказался невероятно эффективным с точки зрения быстрой диагностики и эффективности, что делает его превосходящим грамположительный и PAS в этом конкретном исследовании. [9] В целом, краситель имеет ключевые преимущества для исследовательских и диагностических целей, но у него есть проблема в том, что он немного дорогой и не может быть таким точным для определенных видов.
Ограничения
CFW показывает плохое окрашивание и флуоресценцию нескольких грибковых организмов, включая Coccidioides immitis , Histoplasma capsulatum и Cryptococcus neoformans . Окрашивание Pneumocystis carinii в биоптатах легких с помощью CFW можно оптимизировать путем первоначального CFW при комнатной температуре в течение пяти минут с последующей инкубацией при 65 °C в течение пяти минут. Флуоресценция может быть замаскирована темнопигментированными грибами. [4]
Ссылки
- ^ ab Herth, W.; E. Schnepf (1980). «Флуорохром, калькофлуор белый, связывается ориентированно со структурными полисахаридными фибриллами». Protoplasma . 105 ( 1– 2). Springer: 129– 133. doi :10.1007/BF01279855. ISSN 0033-183X. S2CID 37459059.
- ^ Bidhendi, AJ; Chebli, Y; Geitmann, A (май 2020 г.). «Флуоресцентная визуализация целлюлозы и пектина в первичной клеточной стенке растений». Журнал микроскопии . 278 (3): 164–181 . doi :10.1111/jmi.12895. PMID 32270489. S2CID 215619998.
- ^ Hoch, HC; CD Galvani; DH Szarowski; JN Turner (2005). «Два новых флуоресцентных красителя, применимых для визуализации клеточных стенок грибков». Mycologia . 97 (3): 580– 588. doi :10.3852/mycologia.97.3.580. ISSN 0027-5514. PMID 16392246.
- ^ ab Harrington, Brian J.; Hageage, George (май 2003 г.). «Calcofluor White: обзор его использования и применения в клинической микологии и паразитологии» (документ). Department of Public Health и Department of Microbiology and Immunology, Medical College of Ohio, Pathology Department, Mercy Integrated Laboratories и Department of Microbiology and Immunology, Medical College of Ohio, Toledo, OH.
- ^ ab Afshar, Parvaneh; Larijani, Laleh Vahedi; Rouhanizadeh, Hamed (2012–2018). «Сравнение обычных быстрых методов диагностики поверхностных и кожных микозов на основе красителей KOH, Chicago sky blue 6B и calcofluor white». Iranian Journal of Microbiology . 10 (6): 433– 440. ISSN 2008-3289. PMC 6414738. PMID 30873272 .
- ^ Фриц, Л. и Тример, Р. 1985. Быстрый простой метод с использованием калькофлюора белого M2R для визуализации текальных пластин динофлагеллят. Журнал физиологии, 21: 662-664.
- ^ Hoch, HC; Galvani, CD; Szarowski, DH; Turner, JN (2005-05-01). "Два новых флуоресцентных красителя, применимых для визуализации клеточных стенок грибков". Mycologia . 97 (3): 580– 588. doi :10.1080/15572536.2006.11832788. ISSN 0027-5514. PMID 16392246. S2CID 203428057.
- ^ Biologicals, Daylnn (сентябрь 2005 г.). "Calcofluor White Stain" (PDF) . Dalynn Biologicals . Номер по каталогу SC15.
- ^ Бхавасар, Рашми СК; Годже, Сантош Кумар; Такалкар, Анант Арунрао; Ганвир, Синдху М.; Хазари, Винай К.; Госави, Сучитра Р. (2010). «Обнаружение Candida с помощью Калькофлюора Уайта». Акта Цитологика . 54 (5): 679–684 . doi : 10.1159/000325232. ISSN 0001-5547. PMID 20968155. S2CID 3359124.
Внешние ссылки
- Страница документации продукта от Fluka.
- [1]
 | Эта статья по биологии клетки — заглушка . Вы можете помочь Википедии, расширив ее. |
