раствор Буэна
Биологический консервант, используемый при исследовании тканей

Раствор Буэна , или раствор Буэна , представляет собой сложный фиксатор, используемый в гистологии . [1] Он был изобретен французским биологом Полем Буэном и состоит из пикриновой кислоты , уксусной кислоты и формальдегида в водном растворе. [2] Жидкость Буэна особенно полезна для фиксации биопсий желудочно-кишечного тракта , поскольку этот фиксатор обеспечивает более четкое и лучшее ядерное окрашивание , чем 10%-ный нейтральный буферный формалин. Это не хороший фиксатор, когда необходимо сохранить ультраструктуру ткани для электронной микроскопии . Однако это хороший фиксатор, когда необходимо сохранить структуру ткани с мягкой и нежной текстурой. Уксусная кислота в этом фиксаторе лизирует эритроциты и растворяет небольшие отложения железа и кальция в ткани. Вариант, в котором уксусная кислота заменена муравьиной кислотой, может использоваться как для фиксации ткани, так и для декальцинации. [3] Действие трех химических веществ в растворе Буэна уравновешивает друг друга. Формалин делает цитоплазму базофильной, но этот эффект уравновешивается эффектом пикриновой кислоты. Это приводит к отличному ядерному и цитоплазматическому окрашиванию H&E . Эффект формалина, закаливающий ткани, уравновешивается фиксацией мягких тканей пикриновой и уксусной кислотами. Эффект набухания тканей уксусной кислотой уравновешивается эффектом стягивания тканей пикриновой кислотой. [4]

Гидратированные срезы формальдегид-фиксированной ткани обычно предварительно обрабатываются раствором Буэна для получения правильных результатов в трихромных пятнах для контрастных цветов в коллагеновых и цитоплазматических (мышечных) волокнах. Трихромные методы были разработаны для тканей, фиксированных в кислотных смесях, содержащих хлорид ртути, которые в настоящее время используются только в небольших масштабах.) Для осуществления этой коррекции трихромного окрашивания необходим только компонент пикриновой кислоты раствора Буэна. [5]

При использовании раствора Буэна может возникнуть несколько потенциальных проблем. Из-за формалина в растворе при просмотре срезов тканей под микроскопом может присутствовать формалиновый пигмент. Влажную ткань следует фиксировать в растворе Буэна менее 24 часов. Избыток пикриновой кислоты следует вымывать из ткани с помощью нескольких спиртовых и водных растворов, иначе качество окрашивания может со временем ухудшиться. Влажную ткань, фиксированную в растворе Буэна, следует хранить в спиртовом и водном растворе, а не в растворе Буэна. Поскольку раствор Буэна содержит формальдегид, пикриновую кислоту и уксусную кислоту, следует соблюдать соответствующие меры предосторожности при работе с этими веществами и правила. В частности, следует отметить, что пикриновая кислота может быть взрывоопасной, чувствительной к трению и ударам в сухом виде и при контакте с некоторыми металлами может образовывать нестабильные пикраты металлов.

Под названием «жидкость Буэна» этот фиксатор также широко используется для морских беспозвоночных. [6] Его готовят следующим образом: пикриновая кислота, насыщенный водный раствор – 75 мл; формалин, 40% водный раствор – 25 мл; уксусная кислота, ледяная – 5 мл. [7]

Вариации

Гендерное решение

Раствор Жандра — это спиртовой вариант раствора Буэна. При приготовлении этого раствора вместо водного раствора, насыщенного пикриновой кислотой, используется спиртовой раствор, насыщенный пикриновой кислотой. Этот раствор полезен, когда в тканях необходимо сохранить гликоген и другие углеводы . Его готовят путем смешивания насыщенного раствора пикриновой кислоты в 95% этаноле (80 мл) с формалином (37-40% формальдегида) (15 мл) и ледяной уксусной кислотой (5 мл). [8] Фиксатор Жандра содержит больше пикриновой кислоты, чем фиксатор Буэна, из-за большей растворимости (6,23% м/о) в этаноле, чем в воде (1,23% м/о). [9]

решение Олланда

Раствор Олланда — это вариант раствора Буэна, содержащий ацетат меди . Ацетат меди стабилизирует мембраны эритроцитов и гранулы эозинофилов и эндокринных клеток , так что лизис этих клеточных компонентов происходит меньше, чем в обычном растворе Буэна. [10] Фиксатор Олланда изготавливается путем добавления 6,25 г ацетата меди, 10 г пикриновой кислоты (влажный порошок), 25 мл формалина (37-40% формальдегида) и 2,5 мл ледяной (100%) уксусной кислоты к 250 мл воды. [11]

Ссылки

  1. ^ Карсон, Фрейда Л.; Хладик, Криста (2009). Гистотехнология: Самостоятельный текст (3-е изд.). Гонконг: Издательство Американского общества клинической патологии . стр. 19. ISBN 978-0-89189-581-7.
  2. ^ Каллинг, CFA 1974. Справочник по гистопатологическим и гистохимическим методам (включая музейные методы), 3-е изд. Лондон: Butterworths, стр. 49.
  3. ^ Банкрофт, Джон Д.; Гэмбл, Мэрилин, ред. (2008). Теория и практика гистологических методов (6-е изд.). Китай: Churchill Livingstone Elsevier. стр. 72. ISBN 978-0-443-10279-0.
  4. ^ Бейкер, Дж. Р. 1958. Принципы биологической микротехники. Лондон, Метуэн, стр. 149-150.
  5. ^ Кирнан, JA 2015 Гистологические и гистохимические методы. Теория и практика. Банбери, Великобритания: Scion, стр.195.
  6. ^ Линкольн, Роджер Дж.; Шилс, Джон Гордон, ред. (1979). Беспозвоночные животные - сбор и сохранение (1-е изд.). Великобритания: Британский музей (естественная история). стр. 128. ISBN 0-521-296773.
  7. ^ Каллинг, CFA 1974. Справочник по гистопатологическим и гистохимическим методам (включая музейные методы), 3-е изд. Лондон: Butterworths, стр. 49.
  8. ^ Каллинг, CFA 1974. Справочник по гистопатологическим и гистохимическим методам (включая музейные методы), 3-е изд. Лондон: Butterworths, стр. 49.
  9. ^ Дин, JA 1973. Справочник Ланге по химии, 11-е изд. Нью-Йорк: McGraw-Hill, стр. 7-383.
  10. ^ Карсон, Фрейда Л.; Хладик, Криста (2009). Гистотехнология: Самостоятельный текст (3-е изд.). Гонконг: Издательство Американского общества клинической патологии . стр. 19. ISBN 978-0-89189-581-7.
  11. ^ Грей, П. 1954. Формуляр и руководство микротомиста. Переиздано в 1975 г. Хантингтон, Нью-Йорк: Крейгер, стр. 220.
Взято с "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Bouin_solution&oldid=1117102131"