Маркировка белков TimeSTAMP

Метод маркировки белков

TimeSTAMP (Time – Specific Tag for the Age Measurement of Proteins) – это метод, изобретенный Майклом З. Лином в лаборатории Роджера Циеня Калифорнийского университета в Сан-Диего в 2008 году. Это метод, который позволяет специфически маркировать вновь синтезированные копии генетически помеченного белка .

Принцип техники TimeSTAMP

Метод TimeSTAMP для маркировки вновь синтезированных интересующих белков основан на лекарственно-зависимом сохранении эпитопных меток ^[1]

В этой технике метка, которая присутствует на всех белках, синтезируемых после однократного введения препарата с небольшой молекулой. Для достижения этой цели включается специфическая протеазная активность, придающая эпитопной метке свойство самоудаления. Затем используется соответствующий ингибитор протеазы , чтобы заблокировать удаление метки. В результате будут помечены только те белки, которые синтезируются после применения ингибитора.

Последующий вариант TimeSTAMP позволяет сохранять метки флуоресцентных белков в зависимости от лекарств. ^[2]

Применение техники TimeSTAMP

Поскольку метод TimeSTAMP позволяет осуществлять контролируемую по времени маркировку вновь синтезированных интересующих белков даже в толстых тканях или у интактных животных и обеспечивает чувствительное, специфическое обнаружение, можно изучать распределение вновь синтезированного белка в живом животном.

Ссылки

^ Лин, МЗ; Гленн, Дж. С.; Циен, Р. Ю. (2008). «Метка, контролируемая лекарством, для визуализации вновь синтезированных белков в клетках и целых животных». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 105 (22): 7744– 9. doi : 10.1073/pnas.0803060105 . PMC 2402386. PMID 18511556 .
^ Butko, MT; Yang, J.; Geng, Y.; Kim, HJ; Jeon, NL; Shu, X.; MacKey, MR; Ellisman, MH; Tsien, RY; Lin, MZ (2012). «Флуоресцентные и фотоокислительные метки TimeSTAMP отслеживают судьбу белков в световой и электронной микроскопии». Nature Neuroscience . 15 (12): 1742– 51. doi :10.1038/nn.3246. PMC 3509268 . PMID 23103964.

Внешние ссылки

Сайт лаборатории Tsien

[1] Лин, МЗ; Гленн, Дж. С.; Циен, Р. Ю. (2008). «Метка, контролируемая лекарством, для визуализации вновь синтезированных белков в клетках и целых животных». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 105 (22): 7744– 9. doi : 10.1073/pnas.0803060105 . PMC 2402386. PMID 18511556 .

[2] Butko, MT; Yang, J.; Geng, Y.; Kim, HJ; Jeon, NL; Shu, X.; MacKey, MR; Ellisman, MH; Tsien, RY; Lin, MZ (2012). «Флуоресцентные и фотоокислительные метки TimeSTAMP отслеживают судьбу белков в световой и электронной микроскопии». Nature Neuroscience . 15 (12): 1742– 51. doi :10.1038/nn.3246. PMC 3509268 . PMID 23103964.