Вводный раздел этой статьи может быть слишком длинным . ( Ноябрь 2023 г. ) |
Треозонуклеиновая кислота ( TNA ) — это искусственный генетический полимер , в котором природный пятиуглеродный рибозный сахар, обнаруженный в РНК, был заменен неприродным четырехуглеродным треозным сахаром. [1] Изобретенная Альбертом Эшенмозером в рамках его стремления исследовать химическую этиологию РНК, [2] TNA стала важным синтетическим генетическим полимером ( XNA ) благодаря своей способности эффективно спариваться с комплементарными последовательностями ДНК и РНК. [1] Основное различие между TNA и ДНК/РНК заключается в их остовах. Фосфатные остовы ДНК и РНК прикреплены к 5'-углероду дезоксирибозного или рибозного сахарного кольца соответственно. С другой стороны, TNA имеет свой фосфатный остов, непосредственно прикрепленный к 3'-углероду в кольце, поскольку у нее нет 5'-углерода. Этот модифицированный остов [3] делает TNA, в отличие от ДНК и РНК, полностью устойчивым к расщеплению нуклеазой , что делает его перспективным аналогом нуклеиновой кислоты для терапевтических и диагностических применений. [4]
Олигонуклеотиды TNA были впервые сконструированы с помощью автоматизированного твердофазного синтеза с использованием фосфорамидитной химии. Методы химически синтезированных мономеров TNA (фосфорамидитов и нуклеозидтрифосфатов) были в значительной степени оптимизированы для поддержки проектов синтетической биологии, направленных на продвижение исследований TNA. [5] Совсем недавно усилия по инженерии полимеразы выявили полимеразы TNA , которые могут копировать генетическую информацию туда и обратно между ДНК и TNA. [6] [7] Репликация TNA происходит посредством процесса, который имитирует репликацию РНК. В этих системах TNA подвергается обратной транскрипции в ДНК, ДНК амплифицируется полимеразной цепной реакцией , а затем напрямую транскрибируется обратно в TNA.
Доступность полимераз TNA позволила проводить in vitro отбор биологически стабильных аптамеров TNA как к малым молекулам, так и к белковым мишеням. [8] [9] [10] Такие эксперименты демонстрируют, что свойства наследственности и эволюции не ограничиваются природными генетическими полимерами ДНК и РНК. [11] Высокая биологическая стабильность TNA по сравнению с другими системами нуклеиновых кислот, способными подвергаться дарвиновской эволюции, позволяет предположить, что TNA является сильным кандидатом для разработки терапевтических аптамеров следующего поколения.
Механизм синтеза TNA лабораторно разработанной TNA-полимеразой был изучен с помощью рентгеновской кристаллографии для захвата пяти основных этапов добавления нуклеотидов. [12] Эти структуры демонстрируют несовершенное распознавание входящего нуклеотидтрифосфата TNA и подтверждают необходимость дальнейших экспериментов по направленной эволюции для создания TNA-полимераз с улучшенной активностью. Бинарная структура обратной транскриптазы TNA также была решена с помощью рентгеновской кристаллографии, что выявило важность структурной пластичности как возможного механизма распознавания шаблонов. [13]
Джон Чапут, профессор кафедры фармацевтических наук Калифорнийского университета в Ирвайне , выдвинул теорию о том, что вопросы, касающиеся пребиотического синтеза рибозных сахаров и неферментативной репликации РНК, могут предоставить косвенные доказательства более ранней генетической системы, которая легче производилась в примитивных земных условиях. {{subst: cn }} TNA могла быть ранней генетической системой и предшественником РНК. [14] TNA проще РНК и может быть синтезирована из одного исходного материала. TNA способна передавать информацию вперед и назад с помощью РНК и своих цепей, которые комплементарны РНК. Было показано, что TNA сворачивается в третичные структуры с дискретными свойствами связывания лиганда. [8]
Хотя исследования TNA все еще находятся в зачаточном состоянии, практические применения уже очевидны. Его способность подвергаться дарвиновской эволюции в сочетании с его устойчивостью к нуклеазе делают TNA перспективным кандидатом для разработки диагностических и терапевтических приложений, требующих высокой биологической стабильности. Это будет включать эволюцию аптамеров TNA, которые могут связываться с определенными малыми молекулами и белковыми мишенями, а также разработку ферментов TNA (треозимов), которые могут катализировать химическую реакцию. Кроме того, TNA является перспективным кандидатом для РНК-терапии, которая включает технологию подавления генов. Например, TNA была оценена в модельной системе для антисмысловой технологии. [15]