Псевдотипирование

Псевдотипирование — это процесс производства вирусов или вирусных векторов в сочетании с чужеродными белками вирусной оболочки . Результатом является псевдотипированная вирусная частица, также называемая псевдовирусом . [1] С помощью этого метода чужеродные белки вирусной оболочки могут быть использованы для изменения тропизма хозяина или увеличения или уменьшения стабильности вирусных частиц. Псевдотипированные частицы не несут генетический материал для производства дополнительных белков вирусной оболочки, поэтому фенотипические изменения не могут быть переданы потомству вирусных частиц. В некоторых случаях неспособность производить белки вирусной оболочки делает репликацию псевдовируса некомпетентной . Таким образом, свойства опасных вирусов могут быть изучены в условиях более низкого риска. [2]

Псевдотипирование позволяет контролировать экспрессию белков оболочки. Часто используемый белок — гликопротеин G (VSV-G) из вируса везикулярного стоматита (VSV), который опосредует проникновение через рецептор ЛПНП . Белки оболочки, включенные в псевдовирус, позволяют вирусу легко проникать в различные типы клеток с соответствующим рецептором хозяина .

Разработка вакцины

Псевдотипированный вирус может использоваться для вакцинации животных против белков, экспрессируемых на оболочке вириона. [3] Этот подход использовался для получения вакцин-кандидатов против ВИЧ , [3] генипавируса Нипа , [2] лиссавируса бешенства , [4] SARS-CoV , [5] вируса Эбола Заира , [6] и SARS-CoV-2 . [7] Рекомбинантный вирус везикулярного стоматита – вирус Эбола Заира (rVSV-ZEBOV) был создан Агентством общественного здравоохранения Канады (PHAC) и в настоящее время лицензирован в Европейском союзе и Соединенных Штатах для профилактики болезни Эболавируса (EVD), вызываемой вирусом Эбола Заира .

Серологическое тестирование

Псевдотипированные вирусы, особенно псевдотипированные вирусы, несущие рекомбинантный ген люциферазы (rLuc), можно использовать для проверки того, может ли лечение защитить клетки хозяина от заражения. [8] Например, кровь берут у животного с серологическим иммунитетом к вирусу. Отдельный псевдовирус генерируется с белком оболочки из вируса, к которому у животного есть иммунитет. Псевдовирус далее конструируется так, чтобы он содержал ген люциферазы. Когда кровь, взятую у животного, смешивают с псевдовирусом, защитные антитела связывают и нейтрализуют введенный белок оболочки. В клеточной культуре нейтрализованные псевдовирусы не смогут заражать клетки и производить продукт люминесцентного репортерного гена. При анализе образцы клеточной культуры, в которых присутствует эффективный ингибитор вируса, будут иметь сниженную люминесценцию. [4]

Ссылки

  1. ^ Пример разработки псевдотипических ретровирусных векторов в рабочей группе MHH Архивировано 08.11.2009 на Wayback Machine
  2. ^ аб Не, Цзяньхуэй; Лю, Лин; Ван, Цин; Чен, Жуйфэн; Нин, Тинтин; Лю, Цян; Хуан, Вэйджин; Ван, Ючун (19 февраля 2019 г.). «Псевдовирусная система Nipah позволяет оценивать вакцины in vitro и in vivo с использованием средств, не соответствующих BSL-4». Новые микробы и инфекции . 8 (1): 272–281. дои : 10.1080/22221751.2019.1571871. ISSN  2222-1751. ПМК  6455126 . ПМИД  30866781.
  3. ^ ab Расин, Трина; Кобингер, Гэри П .; Артс, Эрик Дж. (2017-09-12). «Разработка вакцины против ВИЧ с использованием вектора вируса везикулярного стоматита, экспрессирующего дизайнерские гликопротеины оболочки ВИЧ-1 для усиления гуморальных реакций». AIDS Research and Therapy . 14 (1): 55. doi : 10.1186/s12981-017-0179-2 . ISSN  1742-6405. PMC 5594459. PMID 28893277  . 
  4. ^ аб Мёшлер, Сара; Лохер, Самира; Конзельманн, Карл-Клаус; Кремер, Беате; Циммер, Герт (16 сентября 2016 г.). «Количественное определение лиссавирус-нейтрализующих антител с использованием частиц псевдотипа вируса везикулярного стоматита». Вирусы . 8 (9): 254. дои : 10.3390/v8090254 . ISSN  1999-4915. ПМК 5035968 . ПМИД  27649230. 
  5. ^ Кападиа, Сагар У.; Саймон, Ян Д.; Роуз, Джон К. (2008-06-20). «Вакцина против атипичной пневмонии на основе рекомбинантного вируса везикулярного стоматита с дефектом репликации более эффективна, чем вакцина на основе вектора, способного к репликации». Вирусология . 376 (1): 165–172. doi :10.1016/j.virol.2008.03.002. ISSN  0042-6822. PMC 7103385 . PMID  18396306. 
  6. ^ Салата, Кристиано; Калистри, Арианна; Альвизи, Гуальтьеро; Селестино, Микеле; Паролин, Кристина; Палу, Джорджио (2019-03-19). «Вход вируса Эбола: от молекулярной характеристики до открытия лекарств». Вирусы . 11 (3): 274. doi : 10.3390/v11030274 . ISSN  1999-4915. PMC 6466262. PMID 30893774  . 
  7. ^ Джонсон, Марк К.; Лиддон, Терри Д.; Суарес, Рейнир; Сальседо, Брэкстон; ЛеПик, Мэри; Грэм, Мэдди; Рикана, Клифтон; Робинсон, Кэролин; Риттер, Детлеф Г. (14.10.2020). «Оптимизированные условия псевдотипирования для гликопротеина шипа SARS-COV-2». Журнал вирусологии . 94 (21). doi : 10.1128/JVI.01062-20 . ISSN  0022-538X. PMC 7565639. PMID 32788194  . 
  8. ^ Карнелл, Джордж Уильям; Феррара, Франческа; Грехан, Кит; Томпсон, Крейг Питер; Темпертон, Найджел Джеймс (2015-04-29). "Псевдотипические анализы нейтрализации гриппа: систематический анализ". Frontiers in Immunology . 6 : 161. doi : 10.3389/fimmu.2015.00161 . ISSN  1664-3224. PMC 4413832. PMID 25972865  . 
Взято с "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Псевдотипирование&oldid=1188205779"