Перколл
Перколл — это реагент, состоящий из коллоидных частиц кремнезема , используемый в клеточной биологии и других лабораторных условиях. Впервые он был сформулирован Пертофтом и его коллегами [2] и коммерциализирован Pharmacia Fine Chemicals . [3] Перколл используется для изоляции клеток , органелл или вирусов методом центрифугирования в плотности .
Percoll был разработан на основе ранее описанных случаев использования коллоидных наночастиц кремния, покрытых полисахаридами или полимерами, для зонального, изопикнического или равновесного центробежного разделения. [4] Сам Percoll, в частности, состоит из полидисперсных наночастиц кремния диаметром 15–30 нм (23% по весу в воде), которые были покрыты поливинилпирролидоном ( ПВП). Percoll хорошо подходит для экспериментов с градиентом плотности, поскольку он обладает низкой вязкостью по сравнению с альтернативами, низкой осмолярностью и не токсичен для клеток и их компонентов.
Percoll является зарегистрированной торговой маркой Cytiva. [5]
Характеристики
Percoll не сильно диффундирует со временем, что приводит к образованию очень стабильных градиентов. Поэтому как прерывистые, так и непрерывные градиенты плотности Percoll могут быть приготовлены за несколько недель, что обеспечивает большую воспроизводимость и простоту использования. [6]
Прошлое использование в искусственном воспроизводстве
Ранее Percoll использовался в вспомогательных репродуктивных технологиях (ВРТ) для отбора сперматозоидов из семенной жидкости методом центрифугирования в градиенте плотности для использования в таких методах, как экстракорпоральное оплодотворение или внутриматочная инсеминация . Однако в 1996 году Pharmacia разослала лабораториям письмо, в котором говорилось, что Percoll следует использовать только в исследовательских целях, а не в клинических. Pharmacia не позиционировала его как продукт для подготовки спермы; он был переупакован и продан как таковой сторонними производителями. Предупреждающее письмо FDA было вызвано опасениями, что PVP может вызвать повреждение спермы (неизвестная проблема), а также тем, что некоторые партии Percoll содержали высокие уровни эндотоксина (известная проблема). Последнее опасение также относится к использованию Percoll с любыми другими клетками, которые могут быть введены обратно пациенту, поскольку эндотоксин может вызвать сильное воспаление и лихорадку. С тех пор он был заменен другими коллоидами в индустрии ВРТ. [7]
Ссылки
- ^ Рюссманн Л., Юнг А., Хайдрих Х.Г. (1982). «Использование градиентов перколла, элюирования ротором элютриатора и окрашивания митрамицином для изоляции и идентификации внутриэритроцитарных стадий Plasmodium berghei ». Журнал паразитологии . 66 (3): 273–280. doi :10.1007/BF00925344. PMID 6177116.
- ^ Пертофт, Хакан; Лоран, Торвард К. (1977). «Изопикническое разделение клеток и клеточных органелл центрифугированием в модифицированных градиентах коллоидного кремнезема». Методы разделения клеток . Бостон, Массачусетс: Springer US. стр. 25–65. doi :10.1007/978-1-4684-0820-1_2. ISBN 978-1-4684-0822-5.
- ^ Пертофт, Х.; Лоран, ТК; Лаас, Т.; Кагедал, Л. (1978). «Градиенты плотности, полученные из коллоидных частиц кремнезема, покрытых поливинилпирролидоном (Percoll)». Аналитическая биохимия . 88 (1): 271–282. doi :10.1016/0003-2697(78)90419-0.
- ^ Вольф, Дэвид А. (1975). "Глава 5. Разделение клеток и субклеточных частиц с помощью центрифугирования в градиенте плотности коллоидного кремнезема". Методы в клеточной биологии . Elsevier. стр. 85–104. doi :10.1016/s0091-679x(08)60731-1. ISBN 978-0-12-564110-4. ISSN 0091-679X.
- ^ "PERCOLL". Статус товарного знака USPTO и поиск документов . Получено 15 октября 2024 г.
- ^ "Среды для разделения клеток". Cytiva . Получено 24 июня 2023 г. .
- ^ Мортимер, Д. (май–июнь 2000 г.). «Методы подготовки спермы». Журнал андрологии . 21 (3): 357–66. PMID 10819443. Получено 5 мая 2010 г.
