Оперон nik — это оперон, необходимый для поглощения ионов никеля клеткой. Он присутствует во многих бактериях, но был тщательно изучен у Helicobacter pylori . Никель является важным питательным веществом для многих микроорганизмов, где он участвует в различных клеточных процессах. Однако чрезмерный уровень ионов никеля в клетке может быть фатальным для клетки. Концентрация ионов никеля в клетке регулируется опероном nik .
Оперон nik состоит из шести генов. Первые пять генов nikABCDE кодируют компоненты типичной транспортной системы ABC , а последний ген nikR кодирует ДНК-связывающий белок, который подавляет транскрипцию nikABCDE при наличии достаточного количества Ni 2+ . Ген nikR расположен на 5 пар оснований ниже конца nikE и транскрибируется в том же направлении, что и nikABCDE . В следующей таблице приведена структура оперона nik :
Ген | Белок, закодированный | Функциональная роль |
---|---|---|
никА | ABC-транспортер Ni 2+ связывающий компонент | связывает Ni 2+ в периплазме и переносит его в пермеазу ; может также играть роль в хемотаксисе вдали от токсических концентраций никеля |
никБ и никК | Компоненты пермеазы транспортера ABC | транспорт Ni 2+ + через внутреннюю мембрану |
никД и никЕ | Компоненты связывания АТФ транспортера ABC | гидролизует АТФ, обеспечивая энергию для процесса транспорта |
никР | транскрипционный регулятор оперона nikABCDE | подавляет экспрессию оперона nik в присутствии избытка ионов Ni 2+ |
Регулирование экспрессии гена nikR осуществляется двумя промоторами . Первый из них осуществляется через регулон FNR . Регулирование nikABCDE–nikR , контролируемое FNR, происходит в боксе FNR, расположенном выше nikA в предполагаемом сайте связывания NikR. [1] Второй элемент промотора, регулирующий экспрессию nikR, находится на 51 п.н. выше сайта начала транскрипции nikR и приводит к низкоуровневой конститутивной экспрессии. Также имеются данные о том, что экспрессия nikR частично авторегулируется. [2]
Ni 2+ поглощается прокариотическими клетками одним из двух типов высокоаффинных транспортных систем. [3] Первый метод включает транспортеры типа ABC (обсуждаемые в этой статье), а второй механизм использует пермеазы переходных металлов (такие как HoxN Ralstonia eutropha ). Транспортерная система типа ABC состоит из пяти белков, NikA–E, которые осуществляют АТФ-зависимый транспорт Ni 2+ . [1] NikA является растворимым, периплазматическим, связывающим Ni белком; NikB и NikC образуют трансмембранную пору для прохождения Ni; а NikD и NikE гидролизуют АТФ и связывают эту энергию с транспортом Ni 2+ . Когда Ni 2+ доступен в избытке, белок NikR подавляет транскрипцию nikABCDE . [2]
Используя поиск в базе данных последовательностей на основе профилей, было показано, что NikR является членом семейства факторов транскрипции «лента-спираль-спираль» (RHH). [4] Было показано, что N-концевой домен NikR отвечает за связывание с ДНК и что он связывается только в присутствии Ni 2+ . NikR имеет два сайта для связывания с ионами Ni 2+ . Связывание Ni 2+ в концентрациях, которые позволяют полностью занять только высокоаффинные сайты, достаточно для связывания оператора, но сродство к оператору увеличивается в 1000 раз, а следы оператора больше, когда заняты оба сайта связывания никеля. [5] Эти результаты в сочетании с оценками внутриклеточных концентраций Ni 2+ и NikR приводят к выводу, что NikR способен ощущать Ni 2+ и регулировать экспрессию оперона nik в диапазоне внутриклеточных концентраций Ni 2+ от одной до 10 000 молекул на клетку.