Тест Либермана-Бурхарда | |
---|---|
Цель | обнаружение холестерина |
Для обнаружения холестерина используется тест Либермана-Бурхарда или уксусного ангидрида . Положительным результатом является образование зеленого или зеленовато-голубого цвета через несколько минут.
Реактив Либермана-Бурхарда используется в колориметрическом тесте для определения холестерина, который дает глубокий зеленый цвет. Этот цвет начинается с пурпурно-розового цвета и переходит в светло-зеленый, а затем в очень темно-зеленый цвет. Цвет обусловлен гидроксильной группой (-ОН) холестерина, реагирующей с реагентами и увеличивающей сопряжение ненасыщенности в соседнем конденсированном кольце. Поскольку в этом тесте в качестве реагентов используются уксусный ангидрид и серная кислота , необходимо соблюдать осторожность, чтобы не получить серьезные ожоги.
Метод: Растворите один или два кристалла холестерина в сухом хлороформе в сухой пробирке. Добавьте несколько капель уксусного ангидрида, затем 2 капли концентрированной H 2 SO 4 и тщательно перемешайте. После окончания реакции концентрацию холестерина можно измерить с помощью спектрофотометрии .