Семейство Lambda Holin S (λ Holin) (TC# 1.E.2) представляет собой группу интегральных мембранных транспортных белков, принадлежащих к суперсемейству Holin III . [1] Члены этого семейства обычно состоят из характерных трех трансмембранных сегментов (TMS) и имеют в среднем 110 аминокислотных остатков (aas) в длину. Представительный список членов, принадлежащих к этому семейству, можно найти в Базе данных классификации транспортеров .
Лямбда-холин S (лизирующий белок S фага лямбда, холин S105; TC# 1.E.2.1.1) является прототипом холинов класса I. Он имеет 3 TMS с N-концом в периплазме и C-концом в цитоплазме . Его последовательность из 107 кодонов кодирует два белка с противоположными функциями: холин, S105, и ингибитор холина, S107. Последний белок, S107, является 2-аминокислотным расширением первого белка, S105, из-за различного сайта начала трансляционной инициации (M1-K2-M3 против M3). Катионная аминокислота в положении 2 в значительной степени отвечает за ингибирующий эффект S107. Соотношение S105 и S107 влияет на время лизиса клеток , вызванного фагом лямбда . Было показано, что высокогидрофильные С-концевые домены холинов (например, лямбда S105) локализуются цитоплазматически и служат регуляторными доменами. Как и N-концевое 2-аминокислотное расширение в S107, они влияют на время лизиса с помощью заряд-зависимого механизма. [2] [3] [4]
Экспрессия холина S в точно запланированное время после того, как фаговая инфекция прекращает дыхание и позволяет высвобождать муралитический фермент, эндолизин, который гидролизует клеточную стенку. Точечные мутации в гене S, которые предотвращают летальность, изменяют TMS 1 и 2 и соединительную петлю. TMS 2 особенно важен для функции. Для сборки поры был предложен трехступенчатый механизм (мономер → димер → олигомерная пора). [5] S105 (холин) и S107 (ингибитор) образуют абортивный димер. Только когда продукция S105 превышает продукцию S107 (что происходит в определенное время развития), в мембране бактериальной клетки появляются функциональные отверстия. [5] Для холина S105 мотив спираль-поворот-спираль в трансмембранном домене 3 обеспечивает движущую силу димеризации. [6]
Холины регулируют продолжительность цикла заражения хвостатых фагов ( caudovirales ) путем олигомеризации с образованием летальных отверстий в цитоплазматической мембране в момент времени, продиктованный их первичной структурой. Савва и др. (2008) использовали электронную микроскопию и анализ отдельных частиц для характеристики структур, образованных бактериофагом лямбда -холином (S105) in vitro. [7] В неионных или мягких цвиттерионных детергентах очищенный S105, но не лизисно-дефектный вариант S105A52V, образовывал кольца по крайней мере двух классов размеров, наиболее распространенные из которых имеют внутренний и внешний диаметры 8,5 и 23 нм соответственно и содержат приблизительно 72 мономера S105. Высота этих колец, 4 нм, близко соответствует толщине липидного бислоя . Центральный канал имеет беспрецедентный размер для каналов, образованных интегральными мембранными белками, что согласуется с неспецифической природой опосредованной холином проницаемости мембраны. S105, присутствующий в кольцах, растворенных в детергенте, и в инвертированных мембранных везикулах, показал схожую чувствительность к протеолизу и цистеин-специфической модификации, что позволяет предположить, что кольца представляют собой летальные отверстия, образованные S105 для прекращения инфекционного цикла и инициирования лизиса. [7]
Было показано, что гомолог λ холина S из лизогенной Xenorhabdus nematophila , hol-1 (TC #1.E.2.1.4), является функциональным холином. При клонировании в дикий тип E. coli он вызывает гемолиз из-за высвобождения гемолизина SheA. [8] Другой холин (фаговый холин H-19B) кодируется геном, связанным с геном шига-подобного токсина I E. coli. [9] Таким образом, похоже, что холины могут экспортировать различные токсины, а также аутолизины .
Отверстия, вызванные S105, имеют средний диаметр 340 нм, а некоторые превышают 1 микрон. Большинство клеток демонстрируют только одно неправильное отверстие, случайно расположенное в мембране, независимо от ее размера. [10] Во время λ-инфекции S105 безвредно накапливается в мембране, пока не образует одно неправильное отверстие, высвобождая эндолизин из цитоплазмы, что приводит к лизису в течение нескольких секунд. Используя функциональное слияние S105-GFP, было продемонстрировано, что белок равномерно накапливается в мембране, а затем в течение 1 минуты образует агрегаты в момент летальности. Таким образом, подобно бактериородопсину , белок накапливается до тех пор, пока не достигнет критической концентрации для зародышеобразования. [11]
По состоянию на 10 марта 2016 года эта статья полностью или частично получена из Базы данных классификации транспортеров (TCDB) . Владелец авторских прав лицензировал содержимое таким образом, что позволяет повторное использование в соответствии с CC BY-SA 3.0 и GFDL . Все соответствующие условия должны быть соблюдены. Исходный текст был на "1.E.2 Семейство лямбда-холина S (λ-холина)"