Скрытый мембранный белок вируса Эпштейна-Барр 2

Скрытый мембранный белок 2 вируса Эпштейна-Барр (EBV) (LMP2) — это два вирусных белка вируса Эпштейна-Барр . ^[1] LMP2A/LMP2B — это трансмембранные белки, которые блокируют сигнализацию тирозинкиназы . LMP2A — это трансмембранный белок , который ингибирует нормальную передачу сигнала В-клеток, имитируя активированный рецептор В-клеток (BCR). N-концевой домен LMP2A фосфорилирован по тирозину и ассоциируется с протеинтирозинкиназами семейства Src (PTK), а также с тирозинкиназой селезенки ( Syk ). PTK и Syk связаны с передачей сигнала BCR . ^[2]

Латентный мембранный белок 2 (LMP2) — это правонаправленный транскрибирующий ген. Транскрипт LMP2 возникает через слитые концевые повторы в последовательностях на противоположных концах генома . Через 16–24 часа после заражения геном закольцовывается, и создается открытая рамка считывания . ^[3] Сообщения размером 1,7 кб и 2,0 кб создаются путем использования альтернативного промотора и отличаются только последовательностями первого экзона . ^[4] Эти сообщения экспрессируются в культурах лимфобластоидных клеток, трансформированных вирусом Эпштейна-Барр. Соотношение этих сообщений широко и непредсказуемо варьируется, что свидетельствует о слабом скоординированном контроле активности промотора или распространенности мРНК . ^[1] Остатки 497 (LMP2A) и 378 (LMP2B) кодируются этими двумя сообщениями. Эти две изоформы LMP2 отличаются только тем, что LMP2A содержит дополнительный N-концевой домен из 119 остатков, закодированный в экзоне 1. Первый экзон LMP2B некодирующий. Предполагается, что инициация трансляции происходит при первом доступном [метионине], который находится в рамке в экзоне два. Двенадцать мембранных сегментов, заканчивающихся коротким COOH-хвостом из 28 остатков, являются общими для обоих белков в остатке 379. ^[3]

119 аминоконцевых цитоплазматических доменов LMP2A имеют несколько мотивов, которые опосредуют взаимодействия между белками, включая восемь остатков тирозина. Два мотива, которые сосредоточены на Y74 и Y85, расположены на расстоянии 7 остатков друг от друга, образуя иммунорецепторный мотив активации на основе тирозина (ITAM), обычно встречающийся в рецепторах Fc и сигнальных молекулах рецепторов B-клеток и T-клеток. Стыковка рецепторов с молекулами, содержащими цитоплазматические тирозинкиназы, регулируется фосфорилированием мотивов ITAM. ^[3] В культурах лимфобластоидных клеток тирозинкиназы Syk были обнаружены в иммунопреципитатах LMP2A после реакций киназы in vitro с последующей реиммуннопреципитацией антител Syk . ^[5] Эксперименты по аффинной преципитации показали, что Syk взаимодействует с фосфорилированными пептидами , соответствующими комплексу LMP2A-ITAM. ^[3] Остатки для связывания Syk были обнаружены путем индукции точечных мутаций в точках Y74F и Y85F. Тирозинкиназа LYN также была обнаружена в иммунопреципитатах из временно трансфицированных В-клеток в остатке Y112. ^[6] Конститутивное фосфорилирование происходит на остатках тирозина , серина и треонина . ^[3]

Вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) вызывает пожизненную латентную инфекцию в В-лимфоцитах . Вирусная мРНК LMP2A часто обнаруживается в В-лимфоцитах периферической крови, а белок часто присутствует в биопсиях опухолей злокачественных новообразований, вызванных ВЭБ. Это говорит о том, что LMP2A играет важную роль в латентности вируса, а также в прогрессировании заболеваний, связанных с ВЭБ, таких как лимфома Беркитта , носоглоточная карцинома и лимфома Ходжкина . ^{[2] [7]} Портис и Лонгнекер (2004) обнаружили, что LMP2A вызывает активацию пути Ras В-клеток in vivo. Используя ингибиторы компонентов сигнализации Ras ниже по течению, они продемонстрировали, что активация пути PI3K / Akt участвует в опосредованном LMP2A выживании В-клеток и устойчивости к апоптозу ^[2] Колдуэлл и др. (1998) продемонстрировали способность LMP2A обеспечивать сигналы выживания B-клеткам in vivo, где экспрессия трансгена LMP2A у мышей нарушает нормальное развитие B-клеток. Это приводит к тому, что BCR-отрицательные клетки могут покидать костный мозг и выживать в периферических лимфоидных органах. B-клетки из трансгенной линии E LMP2A подвергаются перестройкам легких цепей иммуноглобулина, но не перестройке тяжелых цепей. Это указывает на то, что сигнализация LMP2A обходит необходимость рекомбинации иммуноглобулина и позволяет клеткам иммуноглобулинового типа M обходить апоптоз, позволяя им колонизировать периферические лимфоидные органы. ^{[2] [8]}

Восемь экзонов изоформ LMP2 кодируют 12 мембранных сегментов, которые соединены короткими гидрофильными петлями и заканчиваются цитоплазматическим C-концевым доменом из 27 аминокислот . LMP2B, в отличие от LMP2A, не содержит N-концевой цитоплазматический сигнальный домен из 119 аминокислот . Большинство исследований LMP2 сосредоточено на изоформе LMP2A из-за ее уникальной экспрессии в латентно инфицированных B-лимфоцитах in situ . Функция белка LMP2B неизвестна. Не было проведено всестороннего фенотипического анализа изоформы LMP2B из-за ее гидрофобного характера. Хотя роль LMP2B в патогенезе остается неопределенной, гомологические исследования, сравнивающие ген LMP2 ВЭБ с резус- и бабуинским лимфокриптовирусом , выявили элементы регуляции промотора, чувствительность к ядерному антигену-2 Эпштейна-Барр и способность производить транскрипты LMP2B, которые сохраняются. ^{[2] [9]} Это означает, что непризнанная роль LMP2B в жизненном цикле ВЭБ еще не определена. ^[9]