Вирус, зависимый от помощника
Вирус -помощник , также называемый вирусом без кишки , представляет собой синтетический вирусный вектор, зависящий от помощи вируса-помощника для репликации, [1] и может использоваться в таких целях, как генная терапия . Встречающиеся в природе вирусы-сателлиты также зависят от вируса-помощника и иногда могут быть модифицированы, чтобы стать вирусными векторами.
Вирусный вектор
Поскольку геном вируса «gutless» не включает гены, кодирующие ферменты и/или структурные белки, необходимые для репликации, он считается безопасным для использования в генной терапии , поскольку заражение не может произойти без присутствия подходящего вируса-помощника. [2]
Хорошо отлаженные протоколы позволяют ученым размножать вирусы, зависящие от помощников, в лабораторных условиях. Однако использование настоящего вируса-помощника создает проблемы, когда дело доходит до очистки желаемого трансгенного вируса. Поэтому лабораторные методы часто используют минимальные фрагменты ДНК-помощника, которые могут служить этой цели, не создавая нежелательный вирус. Этот процесс обычно включает введение трех отдельных плазмид ДНК в эукариотическую клеточную линию посредством процесса, называемого трансфекцией . Эти плазмиды содержат либо трансгенную ДНК, либо ДНК, кодирующую репликацию и капсид , плюс ДНК-помощник. Каждая клетка, которая успешно трансфицирована всеми тремя фрагментами ДНК, будет производить необходимые белки для производства инфекционных вирусов. Эти вирусы будут иметь только инкапсулированную трансгенную ДНК, и поэтому после того, как они заразят клетку пациента, они не смогут размножаться. [3]
Вирус-сателлит
Вирусы, зависимые от помощников, также могут встречаться в природе без «выпотрошения». Термин « сателлитный вирус» был дан большой группе вирусов, которым для репликации требуется присутствие другого вируса. Многие из них являются вирусами растений, [4] но вирусы животных можно увидеть в случае зависимых вирусов .
В пределах семейства parvoviridae род депендовирусов получил отдельную классификацию из-за их зависимости от другого вируса. Наиболее известным депендовирусом является аденоассоциированный вирус (AAV), который был первоначально обнаружен как загрязнитель в образце обезьяньего аденовируса . [5] Хотя AAV считается зависимым от аденовируса, он способен реплицироваться в присутствии вируса герпеса, а также определенных цитотоксических событий, таких как УФ- облучение или некоторые канцерогены. [6] В ходе естественной инфекции депендовируса, если вирус-помощник отсутствует, депендовирус часто способен интегрироваться в геном хозяина и переходить в латентную фазу своего жизненного цикла — эффективно ожидая заражения следующим вирусом-помощником. [6] Для использования в генной терапии вектор лишается способности интегрироваться. Поскольку AAV может доставлять трансгенный материал в нереплицирующейся форме, он является сильным кандидатом для генной терапии и в настоящее время используется примерно в 8% клинических испытаний. [7]
Вирус гепатита D (HDV) является примером дефектного по репликации, зависимого от хелпера вируса ssRNA, поскольку ему требуется вирус гепатита B (HBV) для предоставления поверхностного антигена HBV (HBsAg) для инкапсуляции его генома. Оболочечные белки на внешней поверхности HDV полностью предоставляются HBV.
Ссылки
- ^ Альба, Р.; Бош, А.; Чиллон, М. (2005). «Аденовирус без внутренностей: аденовирус последнего поколения для генной терапии». Генная терапия . 12 : S18–27. doi :10.1038/sj.gt.3302612. PMID 16231052. S2CID 2775090.
- ^ Гонсалвес, Мануэль АФВ (2005). «Аденоассоциированный вирус: от дефектного вируса к эффективному вектору». Журнал вирусологии . 2 : 43. doi : 10.1186/1743-422X-2-43 . PMC 1131931. PMID 15877812 .
- ^ Сяо, X; Ли, J; Самульски, RJ (1998). «Производство высокотитровых рекомбинантных аденоассоциированных вирусных векторов в отсутствие аденовируса-помощника». Журнал вирусологии . 72 (3): 2224– 32. doi : 10.1128 /JVI.72.3.2224-2232.1998. PMC 109519. PMID 9499080.
- ^ Кнайп, Дэвид М.; Хоули, Питер М. (2007). Fields Virology (5-е изд.). Lippincott Williams & Wilkins. стр. 126–7 .
- ^ Atchison, RW; Casto, BC; Hammon, W. McD. (1965). «Аденовирус-ассоциированные дефектные вирусные частицы». Science . 149 (3685): 754– 6. Bibcode :1965Sci...149..754A. doi :10.1126/science.149.3685.754. PMID 14325163. S2CID 22084866.
- ^ ab Berns, KI (1990). "Репликация парвовируса". Microbiological Reviews . 54 (3): 316–29 . doi :10.1128/MMBR.54.3.316-329.1990. PMC 372780. PMID 2215424 .
- ^ "Векторы, используемые в клинических испытаниях генной терапии". Gene Therapy Clinical Trials Worldwide . Сентябрь 2019 г. Архивировано из оригинала 21 октября 2019 г. Получено 14 марта 2020 г.
