Термостабилизация

Тепловая стабилизация — это технология консервации без добавок для образцов тканей, которая останавливает деградацию и изменения немедленно и навсегда. Тепловая стабилизация использует быстрый кондуктивный нагрев под контролируемым давлением для создания быстрой, однородной и необратимой тепловой денатурации белков, что приводит к полному и постоянному устранению всей ферментативной активности, которая в противном случае могла бы вызвать дальнейшие биологические изменения в образце ткани ex vivo . Благодаря постоянной инактивации ферментов тепловая стабилизация преодолевает недостатки традиционных методов консервации образцов тканей, таких как мгновенное замораживание с последующим применением ингибиторов. ^[1]

Понимание роли белков , пептидов и малых молекул в нормальной и больной ткани имеет решающее значение для определения их потенциального использования в качестве лекарственных средств, лекарственных мишеней или биомаркеров заболеваний . Однако биологические изменения начинаются в тот момент, когда ткань удаляется из ее родной среды. Радикальные изменения на молекулярном уровне происходят в течение нескольких секунд, например, измененный метаболизм, катаболическая фрагментация больших молекул (таких как АТФ ) происходит для высвобождения энергии, что приводит к нарушению механизмов контроля, состояния фосфорилирования изменяются, и белки начинают деградировать. В результате важная информация может быть потеряна или искажена, что приводит к вариации между образцами, риску неправильной интерпретации данных и потенциально вводящим в заблуждение выводам. ^[2]

Тепловая стабилизация дает значительные преимущества по сравнению с традиционными подходами к предотвращению биологических изменений. ^[3] Его можно использовать для замены мгновенного замораживания с последующим применением ингибиторов, изменением pH, органическими растворителями или сшиванием. Его также можно использовать с замороженными тканями, что позволяет стабилизировать хранящиеся образцы. Тепловая стабилизация может использоваться практически для любого вида образца ткани и, как было подтверждено, совместима со многими последующими аналитическими методами, такими как масс-спектрометрия , ^[4] фосфо-дробовик , ^[5] визуализация MALDI , ^[6] вестерн-блот , ^[7] 1D и 2D гели , обращенно-фазовые белковые массивы, ^[8] РИА и ИФА . Этот метод также позволяет образцам, собранным и обработанным в лабораториях уровня биологической безопасности , впоследствии обрабатываться за пределами таких лабораторий после обработки. ^[9]