Транскрипт, ассоциированный с латентностью HHV ( HHV LAT ), представляет собой длину РНК , которая накапливается в клетках, принимающих долгосрочные или латентные инфекции вируса герпеса человека (HHV). РНК LAT вырабатывается путем генетической транскрипции из определенного региона вирусной ДНК . LAT регулирует вирусный геном и мешает нормальной деятельности инфицированной клетки-хозяина.
Вирус герпеса может установить пожизненную инфекцию, в течение которой популяция вируса- резервуара выживает в нервных клетках хозяина в течение длительных периодов времени. Такая длительная инфекция герпеса требует режима клеточной инфекции, известного как латентная инфекция. Во время латентной инфекции метаболизм клетки хозяина нарушается. В то время как инфицированная клетка обычно подвергается организованной смерти или удаляется иммунной системой , последствия производства LAT мешают этим нормальным процессам.
Латентность отличается от литической инфекции ; при литической инфекции образуется много частиц вируса герпеса, которые затем разрывают или лизируют клетку-хозяина. Литическая инфекция иногда известна как «продуктивная» инфекция. Латентные клетки содержат вирус в течение длительного времени, затем иногда переходят в продуктивную инфекцию, что может привести к рецидиву симптоматических симптомов герпеса .
В латентном состоянии большая часть ДНК герпеса неактивна, за исключением LAT, которая накапливается внутри инфицированных клеток. Область ДНК HHV, которая кодирует LAT, известна как LAT-ДНК. После сплайсинга LAT представляет собой транскрипт длиной 2,0 килооснования (или интрон ), полученный из LAT-ДНК длиной 8,3 килооснования. Область ДНК, содержащая LAT-ДНК, известна как область транскрипта, связанная с латентностью . [1]
LAT в основном выполняет две функции: он подавляет апоптоз , так что латентно инфицированные клетки хозяина остаются живыми для резервуара, [2] и подавляет экспрессию литических генов во время латентной инфекции. [3]
Ген полипептида 0 инфицированных HHV клеток (ICP0) экспрессируется очень рано во время литической инфекции, и по этой причине его называют геном немедленного раннего герпеса. В 1991 году Фаррелл и коллеги сообщили, что интрон LAT размером 2,0 кб заканчивается на 5'-конце антисмысловой РНК- комплементом из 750 оснований для гена ICP0. [1]
В 2005 году Цин-Инь Ван и его коллеги из Гарвардской медицинской школы пришли к выводу, используя анализы, сравнивающие LAT-отрицательные и LAT-положительные штаммы вируса, что экспрессия LAT в нейронах подавляет экспрессию нескольких литических генных продуктов, включая ICP4 и тимидинкиназу. Экспрессия LAT приводит к изменениям в гистонах , тем самым преобразуя части вирусной ДНК в непродуктивную форму, известную как гетерохроматин . [3]
Вирус ветряной оспы обезьян (SVV) — это вирус вирицелловируса (род подсемейства Alphaherpesvirinae ), который экспрессирует гомолог HHV LAT, известный как SVV LAT, и аналог HHV ICP0, известный как SVV-ORF61 (открытая рамка считывания). SVV LAT кодируется таким образом, что содержит антисмысловую копию SVV-ORF61, и эта экспрессия SVV LAT во время латентности подавляет экспрессию ORF61 и других продуктов генов SVV немедленного раннего периода. [4]
LAT ДНК содержит границу активации между активированной LAT-ДНК и неактивной литической вирусной ДНК, называемой хроматиновым инсулятором . [5] Фактор связывания CCCTC ( CTCF ) представляет собой белок с цинковыми пальцами , который естественным образом встречается в некоторых клетках человека. CTCF локализуется в ядре клеток. Было показано, что CTCF [6] естественным образом регулирует экспрессию человеческой линейной двухцепочечной ДНК путем связывания с целевыми последовательностями ДНК или мотивами . Связывание CTCF с ДНК может привести к образованию готового к транскрипции эухроматина через активность ацетилирования гистона H3 , которая возникает из-за связывания CTCF. Ацетилирование гистона способствует транскрипции ДНК в РНК , а затем в белковые продукты. [6]
Исследование Медицинского колледжа Университета Флориды, проведенное в марте 2006 года, показало, что экспрессия генома вируса герпеса может частично регулироваться связыванием CTCF с мотивами связывания CTCF . Исследователи использовали анализ последовательности и количественные геномные анализы на ДНК HHV. В исследовании Университета Флориды было обнаружено, что область LAT содержит область связывания CTCF в пределах области размером 1,5 тыс. пар оснований (пары оснований) и содержит «элемент, подобный инсулятору хроматина». [5] Исследование, проведенное в мае 2007 года в Институте Вистара, локализовало мотив связывания LAT CTCF в последовательности размером 800 пар оснований интрона LAT и продемонстрировало, что область изолировала активированный хроматин LAT от репрессированного хроматина, который в противном случае производил бы литический белок полипептид 0 инфицированных HHV клеток (ICP0) . [7]
Утверждалось, что часть LAT HSV-1 состоит из интерферирующей микроРНК (miRNA), называемой mir-LAT . Показано, что эта miRNA подавляет трансформирующий фактор роста -β1 (TGF-β1) и SMAD3. Эти эффекты блокируют апоптоз , или нормальную запрограммированную гибель клеток . [8] Однако, хотя HSV действительно подавляет апотопсис, конкретная miRNA стала рассматриваться как экспериментальный артефакт, и статья была впоследствии отозвана. [9]
Другие исследования показали, что продукты из первых 4658 нуклеотидов LAT ингибируют клеточные факторы смерти каспазы -8 и каспазы-9. [2] Дальнейшие исследования показали, что HHV-8 LAT производит РНК, которая не влияет на экспрессию TGF-β1 и SMAD3, а снижает экспрессию белка тромбоспондина -1 (THBS-1). В свою очередь, подавление THBS-1 снижает выработку TGF-β1 и SMAD3, подавляя апоптоз. [10]
Экзонные части LAT-ДНК производят два белковых продукта с повторами, которые имеют длину 17 аминокислот, называемые белками, связанными с латентностью HHV или LR-ORF1 и LR-ORF2. Мало что известно об этих двух белках ( P17588 и P17589 в HHV-1; K4PBJ5 и Q77CA8 в BHV-1), хотя потеря ORF2 в бычьем герпесвирусе-1 (BHV-1), по-видимому, мешает установлению латентности. [11] Было показано, что ORF2 обладает свойствами связывания ДНК. По-видимому, он отвечает за ингибирование апотопсиса. [12]