окраска по Фельгену

Окрашивание по Фёльгену — это метод окрашивания, открытый Робертом Фёльгеном и используемый в гистологии для идентификации хромосомного материала или ДНК в образцах клеток. Окрашивание тёмное. Оно зависит от кислотного гидролиза ДНК, поэтому следует избегать использования фиксирующих агентов с сильными кислотами .

Образец подвергается воздействию теплой (60 °C) соляной кислоты , затем реагента Шиффа . Раньше следовало промывание сульфитом , но теперь это считается ненужным. При желании образец можно докрасить светло -зеленым SF желтоватым . Наконец, его обезвоживают этанолом , очищают ксилолом и помещают в смолистую среду.

ДНК должна быть окрашена в красный цвет. Фон, если он контрастно окрашен, зеленый.

Реакция Фельгена является полуколичественным методом. Если единственные альдегиды, оставшиеся в клетке, это те, которые образуются при гидролизе ДНК, то метод является количественным для ДНК. Можно использовать прибор, известный как микроденситометр или микроспектрофотометр, чтобы фактически измерить интенсивность розовой реакции Фельгена для данной органеллы . Используя эту процедуру, было ранее установлено, что интерфазные клетки состоят из двух популяций: с диплоидной ДНК и с тетраплоидной ДНК (два полных генома). Ядра выглядели идентичными, но одно содержало вдвое больше ДНК. Это привело к разделению интерфазного периода клеточного цикла на фазы G1, S и G2 на основе синтеза этой дополнительной ДНК. ^[1]