Метод флуоресценции Фалька-Хилларпа
Метод флуоресценции Фалька-Хилларпа ( метод ФХ ) — это метод, позволяющий демонстрировать и изучать с уникальной точностью и восприимчивостью некоторые моноамины , среди которых три катехоламина: дофамин , норадреналин и адреналин , а также серотонин и родственные ему вещества. [1] [2]
Метод основан на важном и решающем открытии, что эти соединения способны реагировать с формальдегидом — при почти полном отсутствии воды — с образованием флуорофоров , т. е. молекул, которые при облучении невидимым глазу светом будут испускать видимый свет. Это происходит в «сухом» состоянии, без извлечения моноаминов из клеток в течение всей процедуры, процесса, который начинается с отделения образца ткани и заканчивается тонким срезом ткани, который можно исследовать в флуоресцентный микроскоп.
Метод FH впервые позволил исследователю наблюдать, как эти моноамины загораются в микроскоп, и точно определять, в каких клетках они присутствуют, и тем самым понимать их функции. [3] Метод был разработан Бенгтом Фальком и Нильсом-Оке Хилларпом в 1960-х годах на кафедре гистологии Лундского университета . Для интенсивных нейробиологических исследований стало возможным продемонстрировать присутствие моноаминов в нервных клетках, относящихся к центральной и периферической нервной системе , и впервые понять, что эти вещества действуют как сигнальные вещества, т. е. передатчики.
Первая публикация, написанная еще в 1961 году, [4] описывала широкомасштабное исследование нервов, снабжающих большое количество органов в организме. Эта работа подтвердила концепцию Ульфа фон Эйлера , лауреата Нобелевской премии, о том, что норадреналин является сигнальным веществом в периферических автономных нервах. В том же году за этой первой публикацией последовало объяснение химического фона метода F–H.
Очень тонкие мембраны, такие как радужная оболочка глаза или брыжейка крысы, не нужно разрезать для микроскопических исследований, их можно просто разложить на стекле, высушить, а затем подвергнуть воздействию газообразного формальдегида для последующего изучения с помощью флуоресцентного микроскопа.
Публикация о химическом фоне позже была названа среди «200 самых цитируемых статей всех времен». [ необходима цитата ]
В 2012 году медицинский факультет Лундского университета организовал симпозиум «От нерва к таблеткам», посвященный 50-летию первой публикации метода FH.
Ссылки
- ^ Фальк, Б. (1962). «Наблюдения за возможностями клеточной локализации моноаминов методом флуоресценции». Acta Physiol. Scand . 56 (suppl. 197): 1– 25.
- ^ Falck, B.; Hillarp, NA; Thieme, G.; Torp, A. (1982). «Флуоресценция катехоламиновых и родственных им соединений, конденсированных с формальдегидом». Brain Research Bulletin . 9 ( 1– 6): xi– xv. doi :10.1016/0361-9230(82)90113-7. PMID 7172023. S2CID 4706681.
- ^ «Метод Фалька-Хилларпа — революция в изучении моноаминовых систем в ЦНС». Центр нейронауки Валленберга, Лундский университет . 2019-01-09.
- ^ FALCK B; TORP A (1962). «Новые доказательства локализации норадреналина в адренергических нервных окончаниях». Medicina Experimentalis . 6 (3): 169–72 . doi :10.1159/000135153. PMID 13891409.
Внешние ссылки
- Метод флуоресценции Фалька-Хилларпа,
