Адсорбция в расширенном слое

Метод адсорбции во вспученном слое (EBA) представляет собой препаративный хроматографический метод, позволяющий обрабатывать вязкие и твердые жидкости.

Принципы связывания белков в EBA такие же, как и в классической колоночной хроматографии , и можно использовать обычные ионообменные , гидрофобные и аффинные хроматографические лиганды. ^[1] После завершения этапа адсорбции псевдоожиженный слой промывают, чтобы вымыть все оставшиеся частицы. Элюирование адсорбированных белков обычно выполнялось потоком элюента в обратном направлении; то есть, как в обычном насадочном слое, чтобы извлечь адсорбированные растворенные вещества в меньшем объеме элюента. Однако было разработано новое поколение колонок EBA, которые поддерживают слой в расширенном состоянии во время этой фазы, производя высокочистые, высокие выходы, например, MAbs [моноклональных антител] в еще меньших объемах элюента. Продолжительность процесса в производственных масштабах также была значительно сокращена (в некоторых случаях менее 7 часов).

EBA можно рассматривать как объединение этапов «Удаления нерастворимых веществ» и «Изоляции» 4-этапной эвристики обработки вниз по потоку . Основными ограничениями, связанными с технологией EBA, являются взаимодействия биомассы и агрегации на адсорбенте во время обработки. ^[2]

В то время как классическая колоночная хроматография использует твердую фазу, полученную с помощью набивного слоя, EBA использует частицы в псевдоожиженном состоянии, в идеале расширенные в 2 раза. Однако адсорбция в расширенном слое отличается от хроматографии в псевдоожиженном слое по существу двумя способами: во-первых, смола EBA содержит частицы разного размера и плотности, что приводит к градиенту размера частиц при расширении; и, во-вторых, когда слой находится в расширенном состоянии, образуются локальные петли. Частицы, такие как целые клетки или клеточный дебрис, которые засоряют колонку с набивным слоем, легко проходят через псевдоожиженный слой. ^[3] Поэтому EBA можно использовать на сырых культуральных бульонах или суспензиях разрушенных клеток, тем самым минуя начальные этапы очистки, такие как центрифугирование и фильтрация , которые являются обязательными при использовании набивных слоев. В старых конструкциях колонок EBA скорость потока подачи поддерживается достаточно низкой, чтобы твердая набивка оставалась стратифицированной и не псевдоожижалась полностью. Следовательно, EBA можно смоделировать как фронтальную адсорбцию в набивном слое, а не как хорошо смешанный адсорбер с непрерывным потоком.

• «Адсорбция в расширенном слое» на сайте Modern Drug Discovery
• Введение в адсорбцию в расширенном слое

Эта статья по биохимии — заглушка . Вы можете помочь Википедии, расширив ее.

• в
• т
• е

Эта статья по хроматографии — заглушка . Вы можете помочь Википедии, расширив ее.

• в
• т
• е