ЕвроФлоу

Медицинский научный консорциум

Консорциум EuroFlow был основан в 2005 году как проект, финансируемый 2U-FP6, и запущен весной 2006 года. Сначала EuroFlow состоял из 18 диагностических исследовательских групп и двух малых и средних предприятий ( МСП ) из восьми разных европейских стран с взаимодополняющими знаниями и навыками в области проточной цитометрии и иммунофенотипирования . В 2012 году оба МСП вышли из проекта, и он получил полную научную независимость. Целью консорциума EuroFlow является внедрение инноваций и стандартизация проточной цитометрии, что приведет к глобальному улучшению и прогрессу в диагностике гематологических злокачественных новообразований и индивидуализации лечения.

Фон

С 90-х годов иммунофенотипирование (окрашивание клеток антителами, конъюгированными с флуорохромами , и обнаружение с помощью проточного цитометра) стало предпочтительным методом диагностики гематологических злокачественных новообразований . Преимуществами этого метода являются скорость и простота, возможность измерения более 6 параметров одновременно, точная фокусировка на злокачественной популяции, а также широкая применимость в диагностике. Поскольку наблюдается большой прогресс в разработке антител , флуорохромов и многоцветных цифровых проточных цитометров, встал вопрос о том, как интерпретировать цитометрические данные и как достичь сопоставимых результатов между учреждениями. Несмотря на то, что был достигнут консенсус относительно рекомендаций и руководств, стандартизация была лишь частичной, поскольку не учитывались различные клоны антител, флуорохромы и их оптимальные комбинации или подготовка образцов. По этой причине цитометрия воспринимается как метод, сильно зависящий от уровня знаний и с ограниченной воспроизводимостью в многоцентровых исследованиях.

Цели Европотока

Эти цели были изложены в журнале Leukemia в 2012 году. ^[1]

Разработка и оценка новых антител
Создание новой технологии иммуноферментного анализа
Разработка новых программных инструментов, за которыми последовали новые подходы к анализу для распознавания сложных иммунофенотипических паттернов.
Разработка новых многоцветных протоколов и стандартных операционных процедур (СОП)
Разработка и стандартизация быстрой, точной и высокочувствительной проточной цитометрии

Достижения

За последние несколько лет EuroFlow достиг большинства своих целей. Были созданы восьмицветные панели для диагностики, классификации и наблюдения за гематологическими злокачественными новообразованиями . ^[2] Панели, состоящие из скрининговых трубок и дополнительных характеристических трубок, основаны на опыте и знаниях из литературы, но дополнительно оптимизированы и протестированы в нескольких исследовательских центрах на большой коллекции образцов, подвергающих сомнению выбор флуорохромов и стандартизацию настроек прибора и стандартных операционных процедур . ^[3] Клоны антител, флуорохромы и другие реагенты от разных компаний прошли детальное тестирование и сравнение. Одновременно было разработано новое программное обеспечение для анализа более сложных и обширных файлов данных, способное проводить многомерное статистическое сравнение нормальных образцов данных и образцов пациентов. ^[4]^[5] Также были разработаны новые клоны антител против строго отобранных эпитопов белков, участвующих в хромосомных транслокациях, для обнаружения наиболее частых белков слияния при остром лейкозе и хроническом миелоидном лейкозе . Также было введено обнаружение белков слияния с использованием иммуноферментных анализов. ^[6]^[7]^[8]

Ссылки

^ Ван Донген, Дж. Дж. М.; Орфао, А.; Euroflow, Консорциум (2012). «EuroFlow: Переустановка иммунофенотипирования лейкемии и лимфомы. Основа для сопутствующей диагностики и персонализированной медицины». Leukemia . 26 (9): 1899– 907. doi :10.1038/leu.2012.121. PMC 3437406 . PMID 22948488.
^ Ван Донген, JJM; Лермитт, Л; Бетчер, С; Алмейда, Дж; Ван дер Вельден, VHJ; Флорес-Монтеро, Дж; Роустрон, А; Аснафи, В; Лекревис, Q; Лусио, П; Мейстрикова Е; Щепаньский, Т; Калина, Т; Де Тут, Р; Брюггеманн, М; Седек, Л; Каллен, М; Лангерак, AW; Мендонса, А; Макинтайр, Э; Мартин-Аюсо, М; Хрусак, О; Видриалес, МБ; Орфао, А (2012). «Панели антител EuroFlow для стандартизированного n-мерного проточного цитометрического иммунофенотипирования нормальных, реактивных и злокачественных лейкоцитов». Лейкемия . 26 (9): 1908– 75. doi :10.1038/leu.2012.120. ПМЦ 3437410 . ПМИД 22552007.
^ Калина, Т; Флорес-Монтеро, Дж; Ван дер Велден, VHJ; Мартин-Аюсо, М; Бетчер, С; Ритген, М; Алмейда, Дж; Лермитт, Л; Аснафи, В; Мендонса, А; Де Тут, Р; Каллен, М; Седек, Л; Видриалес, МБ; Перес, Джей-Джей; Те Марвелде, JG; Мейстрикова Е; Хрусак, О; Щепаньский, Т; Ван Донген, JJM; Орфао, А (2012). «Стандартизация EuroFlow настроек приборов проточного цитометра и протоколов иммунофенотипирования». Лейкемия . 26 (9): 1986–2010 . doi :10.1038/leu.2012.122. ПМЦ 3437409 . PMID 22948490.
^ Педрейра, Карлос Э.; Коста, Элейн С.; Баррена, Сусана; Лекревисс, Квентин; Алмейда, Джулия; Ван Донген, Жак Ж. М.; Орфао, Альберто; Euroflow, Консорциум (2008). «Создание файлов данных проточной цитометрии с потенциально бесконечным числом измерений». Цитометрия Часть A. 73A ( 9): 834– 46. doi :10.1002/cyto.a.20608. PMID 18629843. S2CID 12560225.
^ Коста, ES; Педрейра, CE; Баррена, S; Лекревисс, Q; Флорес, J; Кихано, S; Алмейда, J; Дель Кармен Гарсия-Масиас, M; Боттчер, S; Ван Донген, JJM; Орфао, A (2010). «Автоматизированный анализ главных компонентов на основе шаблонов против иммунофенотипической классификации хронических лимфопролиферативных заболеваний В-клеток на основе экспертов: шаг вперед в стандартизации клинического иммунофенотипирования». Leukemia . 24 (11): 1927– 33. doi :10.1038/leu.2010.160. PMC 3035971 . PMID 20844562.
^ Деккинг, Э.; Ван дер Вельден, VHJ; Бетчер, С.; Брюггеманн, М.; Зонневельд, Э.; Конинг-Годхер, А.; Бёккс, Н.; Лусио, П.; Седек, Л.; Щепаньский, Т.; Калина Т.; Ковач, М.; Эванс, П.; Хугевен, П.Г.; Флорес-Монтеро, Дж.; Орфао, А.; Команс-Битер, ВМ; Стаал, ФЙТ; Ван Донген, JJM (2010). «Обнаружение слитых генов на уровне белка у больных лейкемией с помощью проточно-цитометрического иммуноферментного анализа». Передовая практика и исследования в области клинической гематологии . 23 (3): 333–45 . doi :10.1016/j.beha.2010.09.010. ПМИД 21123134.
^ Деккинг, EHA; Ван дер Вельден, VHJ; Варрон, Р; Вай, Х; Бетчер, С; Кнеба, М; Зонневельд, Э; Конинг, А; Бёккс, Н.; Ван Поке, Н.; Лусио, П; Мендонса, А; Седек, Л; Щепаньский, Т; Калина, Т; Кандерова, В; Хугевен, П; Флорес-Монтеро, Дж; Шильон, MC; Орфао, А; Алмейда, Дж; Эванс, П; Каллен, М; Нордейк, Алабама; Вермюлен, премьер-министр; Де Ман, Монтана; Диксон, EP; Команс-Битер, ВМ; Ван Донген, JJM (2012). «Проточный цитометрический иммуноферментный анализ для быстрого и простого обнаружения белков слияния PML–RARA для диагностики острого промиелоцитарного лейкоза». Leukemia . 26 (9): 1976– 85. doi :10.1038/leu.2012.125. PMC 3437408 . PMID 22948489.
^ Веркамп, Ф; Деккинг, Э; Нг, ГГ; Ван дер Велден, VHJ; Вай, Х; Бетчер, С; Брюггеманн, М; Ван дер Слейс, AJ; Конинг, А; Бёккс, Н.; Ван Поке, Н.; Лусио, П; Мендонса, А; Седек, Л; Щепаньский, Т; Калина, Т; Ковач, М; Хугевен, П.Г.; Флорес-Монтеро, Дж; Орфао, А; Макинтайр, Э; Лермитт, Л; Чен, Р; Брауэр-Де Кок, KAJ; Ван Дер Линден, А; Нордейк, Алабама; Команс-Битер, ВМ; Стаал, ФЙТ; Ван Донген, JJM; Европоток, Консорциум (2009). «Проточный цитометрический иммуноферментный анализ для обнаружения белков слияния BCR–ABL у пациентов с лейкемией». Leukemia . 23 (6): 1106– 17. doi :10.1038/leu.2009.93. PMID 19387467.

Внешние ссылки

ЕвроФлоу

[test-1] Ван Донген, Дж. Дж. М.; Орфао, А.; Euroflow, Консорциум (2012). «EuroFlow: Переустановка иммунофенотипирования лейкемии и лимфомы. Основа для сопутствующей диагностики и персонализированной медицины». Leukemia . 26 (9): 1899– 907. doi :10.1038/leu.2012.121. PMC 3437406 . PMID 22948488.

[2] Ван Донген, JJM; Лермитт, Л; Бетчер, С; Алмейда, Дж; Ван дер Вельден, VHJ; Флорес-Монтеро, Дж; Роустрон, А; Аснафи, В; Лекревис, Q; Лусио, П; Мейстрикова Е; Щепаньский, Т; Калина, Т; Де Тут, Р; Брюггеманн, М; Седек, Л; Каллен, М; Лангерак, AW; Мендонса, А; Макинтайр, Э; Мартин-Аюсо, М; Хрусак, О; Видриалес, МБ; Орфао, А (2012). «Панели антител EuroFlow для стандартизированного n-мерного проточного цитометрического иммунофенотипирования нормальных, реактивных и злокачественных лейкоцитов». Лейкемия . 26 (9): 1908– 75. doi :10.1038/leu.2012.120. ПМЦ 3437410 . ПМИД 22552007.

[3] Калина, Т; Флорес-Монтеро, Дж; Ван дер Велден, VHJ; Мартин-Аюсо, М; Бетчер, С; Ритген, М; Алмейда, Дж; Лермитт, Л; Аснафи, В; Мендонса, А; Де Тут, Р; Каллен, М; Седек, Л; Видриалес, МБ; Перес, Джей-Джей; Те Марвелде, JG; Мейстрикова Е; Хрусак, О; Щепаньский, Т; Ван Донген, JJM; Орфао, А (2012). «Стандартизация EuroFlow настроек приборов проточного цитометра и протоколов иммунофенотипирования». Лейкемия . 26 (9): 1986–2010 . doi :10.1038/leu.2012.122. ПМЦ 3437409 . PMID 22948490.

[4] Педрейра, Карлос Э.; Коста, Элейн С.; Баррена, Сусана; Лекревисс, Квентин; Алмейда, Джулия; Ван Донген, Жак Ж. М.; Орфао, Альберто; Euroflow, Консорциум (2008). «Создание файлов данных проточной цитометрии с потенциально бесконечным числом измерений». Цитометрия Часть A. 73A ( 9): 834– 46. doi :10.1002/cyto.a.20608. PMID 18629843. S2CID 12560225.

[5] Коста, ES; Педрейра, CE; Баррена, S; Лекревисс, Q; Флорес, J; Кихано, S; Алмейда, J; Дель Кармен Гарсия-Масиас, M; Боттчер, S; Ван Донген, JJM; Орфао, A (2010). «Автоматизированный анализ главных компонентов на основе шаблонов против иммунофенотипической классификации хронических лимфопролиферативных заболеваний В-клеток на основе экспертов: шаг вперед в стандартизации клинического иммунофенотипирования». Leukemia . 24 (11): 1927– 33. doi :10.1038/leu.2010.160. PMC 3035971 . PMID 20844562.

[6] Деккинг, Э.; Ван дер Вельден, VHJ; Бетчер, С.; Брюггеманн, М.; Зонневельд, Э.; Конинг-Годхер, А.; Бёккс, Н.; Лусио, П.; Седек, Л.; Щепаньский, Т.; Калина Т.; Ковач, М.; Эванс, П.; Хугевен, П.Г.; Флорес-Монтеро, Дж.; Орфао, А.; Команс-Битер, ВМ; Стаал, ФЙТ; Ван Донген, JJM (2010). «Обнаружение слитых генов на уровне белка у больных лейкемией с помощью проточно-цитометрического иммуноферментного анализа». Передовая практика и исследования в области клинической гематологии . 23 (3): 333–45 . doi :10.1016/j.beha.2010.09.010. ПМИД 21123134.

[7] Деккинг, EHA; Ван дер Вельден, VHJ; Варрон, Р; Вай, Х; Бетчер, С; Кнеба, М; Зонневельд, Э; Конинг, А; Бёккс, Н.; Ван Поке, Н.; Лусио, П; Мендонса, А; Седек, Л; Щепаньский, Т; Калина, Т; Кандерова, В; Хугевен, П; Флорес-Монтеро, Дж; Шильон, MC; Орфао, А; Алмейда, Дж; Эванс, П; Каллен, М; Нордейк, Алабама; Вермюлен, премьер-министр; Де Ман, Монтана; Диксон, EP; Команс-Битер, ВМ; Ван Донген, JJM (2012). «Проточный цитометрический иммуноферментный анализ для быстрого и простого обнаружения белков слияния PML–RARA для диагностики острого промиелоцитарного лейкоза». Leukemia . 26 (9): 1976– 85. doi :10.1038/leu.2012.125. PMC 3437408 . PMID 22948489.

[8] Веркамп, Ф; Деккинг, Э; Нг, ГГ; Ван дер Велден, VHJ; Вай, Х; Бетчер, С; Брюггеманн, М; Ван дер Слейс, AJ; Конинг, А; Бёккс, Н.; Ван Поке, Н.; Лусио, П; Мендонса, А; Седек, Л; Щепаньский, Т; Калина, Т; Ковач, М; Хугевен, П.Г.; Флорес-Монтеро, Дж; Орфао, А; Макинтайр, Э; Лермитт, Л; Чен, Р; Брауэр-Де Кок, KAJ; Ван Дер Линден, А; Нордейк, Алабама; Команс-Битер, ВМ; Стаал, ФЙТ; Ван Донген, JJM; Европоток, Консорциум (2009). «Проточный цитометрический иммуноферментный анализ для обнаружения белков слияния BCR–ABL у пациентов с лейкемией». Leukemia . 23 (6): 1106– 17. doi :10.1038/leu.2009.93. PMID 19387467.