6S / SsrS РНК | |
---|---|
Идентификаторы | |
Символ | 6С |
Рфам | РФ00013 |
Другие данные | |
Тип РНК | Ген |
Домены | Бактерии |
ТАК | SO:0000376 |
Структуры PDB | ПДБе |
В области молекулярной биологии 6S РНК — это некодирующая РНК , которая была идентифицирована и секвенирована одной из первых. [1] То, что она делает в бактериальной клетке, было неизвестно до недавнего времени. В начале 2000-х годов ученые обнаружили, что функция 6S РНК заключается в том, чтобы быть регулятором транскрипции генов, зависящей от сигма 70. Все бактериальные РНК-полимеразы имеют субъединицу, называемую сигма-фактором. Сигма-факторы важны, поскольку они контролируют связывание промотора ДНК и стартовые сайты транскрипции РНК. Сигма 70 была первой, обнаруженной в Escherichia coli. [2] [3]
Структура 6S РНК была определена в 1971 году. [2] Это небольшая цепь РНК, состоящая из 184 нуклеотидов. 6S РНК представляет собой длинную двухцепочечную структуру и имеет одноцепочечную петлю. Структура похожа на открытый промоторный комплекс структуры ДНК. Различные анализы обнаружили, что 6S РНК способны образовывать вторичную структуру. [4] Вторичная структура состоит из двух нерегулярных спиральных стволовых областей, образующих большую петлю ядра, которая называется центральным узлом.
Функция 6S РНК заключается в регулировании транскрипции для выживания клеток E. coli , поскольку она необходима в этом процессе. [5] 6S РНК специфически связывается с голоферментом РНК-полимеразы, содержащим фактор специфичности сигма70. Это взаимодействие подавляет экспрессию с промоторов, зависимых от сигма70, во время стационарной фазы. [6] Что приведет к активации транскрипции с промоторов, зависимых от сигма 70. Поэтому во время перехода E. coli от логарифмического роста к стационарной фазе, 6S РНК действует как регулятор транскрипции. Гомологи 6S РНК недавно были идентифицированы в большинстве бактериальных геномов. [3] [7] Холофермент полимеразы, который содержит фактор домашнего хозяйства сигма и может экспрессироваться на разных стадиях роста. Во многих Pseudomonadota 6S РНК может быть обработана из транскрипта, кодирующего гомологи белка E. coli YgfA, который является предполагаемой метенилтетрагидрофолатсинтетазой . Дивергентные 6S РНК были идентифицированы в дополнительных бактериальных линиях. [8] [9] Экспериментально показано, что мотив purD РНК перекрывается с 6S РНК. [ 8 ] Один из способов проверить активность 6S РНК — выключить 6S РНК. Штаммы с мутациями в 6S РНК имеют сокращение продолжительности жизни по сравнению с клетками дикого типа после более чем 20 дней непрерывного культивирования. Когда мутантные 6S клетки культивируются с клетками дикого типа, они будут находиться в умеренно невыгодном положении в последующие дни роста. [10]
Недавно обнаруженные гомологи 6S — это две РНК Bacillus subtilis и РНК цианобактерий. Две 6S РНК, 6S-1 и 2, вместе с их кодирующими генами bsrA и B, присутствуют в различных позициях генома. В стационарной фазе делеция 6S-1 у B. subtilis приводит к ингибированию его роста . С другой стороны, отсутствие 6S-2 РНК, по-видимому, не влияет на рост и споруляцию в стационарной фазе. [11] Консервативная особенность 6S РНК показывает, что она связывается с РНК-полимеразой, реплицируя структуру ДНК-матрицы. [12] Промотор-зависимая регуляция транскрипции опосредуется 6S РНК, поскольку некоторые промоторы могут быть подавлены, а некоторые нечувствительны в присутствии 6S РНК. Исследования экспрессии генов показали, что 6S РНК интегрирована в различные глобальные пути, например, она регулирует различные факторы, влияющие на транскрипцию, такие как Crp, FNR и т. д., и механизм трансляции. [13]
Ученый обнаружил, что 6S РНК связывается с активным сайтом РНК-полимеразы и может служить шаблоном для синтеза РНК, необходимого для синтеза РНК. [14] Он подавляет транскрипцию от 3´ до 5´ раз на различных промоторах, но не подавляет транскрипцию во время поздней стационарной фазы. В среде с дефицитом питательных веществ контроль транскрипции 6S РНК приводит к изменению выживаемости клеток, возможно, за счет перенаправления потребления ресурсов. [13]
С помощью анализа SDS-PAGE было выявлено, что 6S РНК присутствует в E. coli и покрывает почти 25% от общего числа рибосом. По оценкам, в геноме E. coli присутствует 1000-1500 молекул . Хотя 6S РНК, по-видимому, не связана с рибосомами, она, по-видимому, связана с несколькими белками и мигрирует около 11S. [15]
6S РНК является регулятором РНК-полимеразы и в изобилии присутствует в бактериях. Исследования показали, что 6S РНК образует комплекс с РНК-полимеразой для инициации транскрипции. Отсутствие 6S РНК в клетках приводит к изменению фенотипов. [13]
Уникальной особенностью 6S РНК является то, что она действует как шаблон для синтеза РНК, а длина и распространенность РНК варьируются в зависимости от физиологии клетки. Синтез pRNA имеет решающее значение, поскольку он высвобождает РНК-полимеразу, которая позволяет обратить вспять ингибирование. [16]
Структурный и функциональный анализы показали взаимодействие между РНК-полимеразой и 6S РНК E. coli . Функциональное разнообразие 6S РНК было обнаружено в ходе исследований транскриптома по всему геному. Многочисленные недавние исследования показали, что 6S РНК выполняет функцию стража, регулируя эффективное использование клеточных ресурсов в ограниченных условиях и стрессе. [17] Взаимодействуя с сигма-70-зависимым РНК-полимеразным голоферментом в стационарной фазе, обнаружено, что высокая распространенность 6S РНК влияет на транскрипцию генов, что приводит к регуляции ответа бактерий на такие вызовы, как голод. [11]
6S РНК в E. coli обильно увеличивается в течение всей логарифмической и ранней стационарной фазы. Таким образом, ожидается, что увеличение уровня 6S РНК регулирует изменения в экспрессии генов, чтобы помочь адаптации к проблемам окружающей среды, таким как дефицит питания и высокая плотность клеток.
Была выявлена роль 6S РНК в бактериальной вирулентности, включая L. pneumophila и Salmonella enterica серовар Typhimurium, в частности, когда патогенез связан с репликацией и устойчивостью к стрессу. [18]